СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ СУЩЕСТВУЮЩИХ ГЕЛЬМИНТООВОСКОПИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ВЫЯВЛЕНИЯ ЯИЦ Toxocara canis и Toxocara cati И ИХ УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ

Дмитрий Александрович Долбин¹, научный сотрудник, кандидат биологических наук, dda_sns@mail.ru

Минсагит Хайруллович Лутфуллин² , доктор ветеринарных наук, профессор, parasitology-kazan@mail.ru

Юрий Александрович Тюрин¹, зав. лабораторией, ведущий научный сотрудник, кандидат медицинских наук

¹Казанский НИИ Эпидемиологии и микробиологии, 420015, г. Казань, ул. Большая красная 67, Россия

²Казанская государственная академия вететринарной медицины им. Н. Э. Баумана, 420029, г. Казань, ул. Сибирский тракт, 35, Россия

Резюме.

Предложен новый метод выявления яиц токсокар в фекалиях. Данный метод отличается большей эффективностью, по сравнению с аналогичными предложенными ранее методами и может быть использован как в диагностике, так и эпидемиологических и эпизоотологических исследованиях по распространённости токсокароза у человека и плотоядных животных.

Ключевые слова: токсокароз, диагностика, флотация.

В настоящий момент времени приходится констатировать, что проблема эффективной прижизненной диагностики инвазии токсокарами собак является не решенной. Используемые же методы копроскопической диагностики можно уверенно отнести к морально устаревшим и не удовлетворяющим современным требованиям, как к диагностической эффективности, так и стандартизации и унификации процедур и оборудования, диктуемых научной и практической целесообразностью.

Наибольшего эффекта можно было бы ожидать от применения методов сочетающих седиментацию осадка с последующей флотацией яиц в растворах с высокой удельной плотностью (Р. Т. Сафиуллин, 2001) так называемые комбинированные методы). Но как неоднократно указывалось в литературе между количеством выявляемых яиц и плотностью растворов нет строгого соответствия. Кроме плотности, на эффективность диагностики влияет значительное количество других факторов. Среди них скорость кристаллизации раствора (один из главных недостатков всех однокомпонентных солевых флотационных растворов), большое количество детрита затрудняющего поиск при использовании очень плотных растворов и др. Выход можно найти в использовании флотационных растворов состоящих из нескольких ингредиентов, каждый из которых выполняет определенную функцию, замедляет время кристаллизации капли на предметном стекле, удешевляет стоимость проводимого анализа, увеличивает удельную плотность смеси и т. д.

Данный подход был успешно применен авторами при усовершенствовании методов диагностики ряда кишечных паразитозов (неоаскариоза крупного рогатого, аскаридоза человека, лямблиоза человека.

К сожалению, хороший результат можно получить лишь, проведя довольно масштабную эмпирическую работу с целью усовершенствования копроскопической диагностики.

Разработанный нами несколькокомпоненнтный комбинированный метод выявления яиц токсокар в пробах фекалий собак позволял в 7 раз увеличить процент выявления оплодотворенных яиц по сравнению с альтернативным методом Фюллеборна, а также позволил выявлять неоплодотворенные яйца данных паразитов, что обычно чрезвычайно затруднительно при прочих гельминтоовоскопических методах.

Для гельминтоовоскопической диагностики кишечных гельминтозов плотоядных применяются следующие методы: 1. Метод Фюллеборна. Его недостатком является длительность флотации (40 – 60 минут) и низкая эффективность. 2. Метод Котельникова–Хренова. Недостатком данного метода является сильная насыщенность флотационного раствора, вследствие чего происходит быстрая кристаллизация капель на предметном стекле, что препятствует исследованию материала и отрицательно сказывается на результатах.

Пробу фекалий весом 3 – 5 г помещают в стакан, заливали небольшим количеством воды, тщательно размешивали до появления равномерной взвеси, затем добавляли еще 50 – 100 мл воды и процеживали через металлическое сито или марлю в сухой, чистый стакан. После 5 минутного отстаивания надосадочную жидкость сливали. На дне стакана оставляли такое количество взвеси, которое бы уместилось в центрифужную пробирку. Затем проводили 3-х минутное центрифугирование при 3000 g, всю жидкость до осадка сливают, и к осадку добавляли трехкомпонентный флотационный раствор. Осадок взбалтывали до получения взвеси и снова центрифугировали 3 минуты при 1500 g. После металлической петлей снимали поверхностную пленку, переносят на предметное стекло и исследовали под микроскопом.

Исследования проб фекалий по методу Фюллеборна проводили следующим общепринятым способом.

Сравнение авторского способа и метода Фюлеборна при обследовании приюта для собак в городе Казань приведено в Таблице 2.

В результате обследования разработанный способ позволил выявить почти на порядок большее количество яиц гельминтов. Этот метод показал 100% инвазированность обследованных животных. Кроме того, авторский метод позволил выявить неоплодотворенные яйца Toxoascaris leonine. Метод Фюллеборна оказался менее эффективен.

Таким образом, разработанный нами способ диагностики гельминтозов у плотоядных обладает более выраженной диагностической эффективностью по сравнению с используемым аналогом (метод Фюллеборна).

Таблица 2

Исследование проб фекалий собак, приюта бездомных животных в

г, Казань

№ п/п	Группы животных	Количество яиц в 1 г фекалий
		Фюллеборна	Авторский
1 2 3 4 5 6	1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 5 группа 6 группа	34± 1,5 45± 4,1 50 ± 2,5 75 ± 3,8 100± 7,55 56± 3,5	203 ± 3,5 300 ± 10,5 315 ± 1,51 424 ± 11,7 185 ± 8,68 125 ± 5,2

Примечание: 1 – 5 группы – щенки; 6 – группа – взрослые собаки.

По результатам гельминтоовоскопического обследования была проведена дегельминтизация собак (азинокс плюс в дозе 1 таблетка на 10 кг массы тела животного).

Литература

1) Уркхарт Г., Эрмур Дж., Дункан Дж,, Данн А., Дженнингс Ф. Ветеринарная паразитология. – М., «Аквариум». С. 87 – 92.

2) Абуладзе К. И. Паразитология и инвазионные болезни сельскохозяйственных животных. – М. Агропромиздат, 1990. – С. 167 – 169.

3) Акбаев М. Ш., Абуладзе К. И., Тараканов и др. (под ред. Акбаева М. Ш.) – Практикум по диагностике инвазионных болезней животных. – М.: «Колос», 1994. – С. 63 – 64.

4) Акбаев М. Ш., Водянов А. А. и др. Паразитология и инвазионные болезни животных. – М. Издат. Колос, 2002.– C. 173 – 268.

5) Сафиуллин Р. Т. Сравнительная эффективность копроскопических методов диагностики гельминтозов свиней и их усовершенствование на основе стандартизации. / Р. Т. Сафиуллин // Тр. ВИГИСа. – 2001. – Т. 37. – С. 149 – 159.