Инфекционные болезни/12. Медицина

К.мед.н. Меленко С.Р., Андрущак М.А., Кривецкая С.С.

Буковинский государственный медицинский университет, Украина

Современные методы диагностики ВИЧ-инфекции

Основные методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции включают выявление антител к вирусу, вирусных антигенов и выделение вируса в культуре клеток [1].

"Золотым" стандартом диагностики ВИЧ-инфекции служит определение антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа. Чувствительность метода составляет более 99,5%. Используются наборы тест-систем, позволяющие определять антитела как к ВИЧ-1, так и к ВИЧ-2. Специфичность этого метода низкая. Причинами ложноположительного результата могут быть наличие в сыворотке антител к HLA класса II и другим аутоантигенам, болезни печени или недавняя вакцинация против гриппа [3].

Для подтверждения диагноза ВИЧ-инфекции используют иммуноблоттинг. Результат иммуноблоттинга считается положительным, если на мембране видны полосы, соответствующие любым двум из трех антигенов ВИЧ — р24, gp41 и gp 120 (или gp 160). Положительный результат иммуноблоттинга подтверждает диагноз ВИЧ-инфекции. Если результат иммуноблоттинга нельзя расценить как положительный или отрицательный, его считают сомнительным.

Для подтверждения диагноза ВИЧ-инфекции можно использовать также ловушечный ИФА на антиген р24 и методы выявления вирусной РНК [2].

Сначала проводится ИФА. При отрицательном результате и отсутствии данных на возможность инфицирования, диагноз ВИЧ-инфекции исключается. ИФА повторяют, если есть риск инфицирования или результат положительный (сомнительный). Если результаты повторных ИФА положительны или сомнительны, проводят иммуноблоттинг. Положительный результат иммуноблоттинга служит подтверждением диагноза ВИЧ-инфекции. При отрицательном результате иммуноблоттинга результаты ИФА считают ложноположительными и исключают диагноз ВИЧ-инфекции. Если результат иммуноблоттинга сомнителен, то приблизительно через месяц это исследование повторяют.

Дополнительно можно провести исследования с помощью ловушечного ИФА на антиген р24 или ПЦР для определения вирусной ДНК или РНК. Если результаты дополнительных исследований отрицательны, а окраска полос при повторном иммуноблоттинге не претерпела изменений, то диагноз ВИЧ-инфекции исключают. При усилении окраски полос или положительном результате хотя бы одного из дополнительных исследований ставят предположительный диагноз ВИЧ-инфекции, и иммуноблоттинг проводят повторно через несколько месяцев. Положительный результат иммуноблоттинга подтверждает диагноз.

Ловушечный ИФА на антиген р24. Это модификация ИФА, при которой антитела к вирусному белку р24 иммобилизируют на твердой подложке. При добавлении сыворотки больного происходит сорбция антигена на этих антителах. В течение нескольких недель после заражения, до развития гуморального иммунного ответа на ВИЧ, концентрация белка р24 в сыворотке ВИЧ-инфицированных резко возрастает. При появлении в крови антител к белку р24 концентрация этого антигена снижается. На поздних стадиях ВИЧ-инфекции, сопровождающихся выраженной виремией, концентрация белка р24 в сыворотке вновь возрастает. В настоящее время ловушечный ИФА на антиген р24 применяется для диагностики ВИЧ-инфекции во время острой фазы, когда концентрация этого антигена высока, а антител к белкам ВИЧ, наоборот, низка.

ПЦР. Лабораторные методы, основанные на ПЦР, используют при положительных (или сомнительных) результатах ИФА и сомнительных результатах иммуноблоттинга, а также в тех случаях, когда серологическое исследование нецелесообразно (например, при диагностике ВИЧ-инфекции у больных с гипогаммаглобулинемией). Однако из-за высокой стоимости и большого количества ложноположительных результатов, обусловленных загрязнением исследуемых проб, эти методы применяют лишь в тех случаях, когда стандартное серологическое исследование не позволяет с уверенностью поставить или исключить диагноз ВИЧ-инфекции [4, 5].

Диагностика ВИЧ-инфекции на данном этапе проводится на высоком уровне, но поиск надежных и доступных методов исследования в условиях мирового кризиса остается актуальным вопросом современности.

Литература:

1. Андрейчин М. А. Інфекційна захворюваність в Україні: ілюзії та реалії / М. А. Андрейчин // Інфекційні хвороби. – 2008. – № 3. – С. 77-84.

1. Барлет Д. Клинические аспекты ВИЧ-инфекции / Д. Барлет, Д. Галант. – MMHIV. – 2007. – 557 с.

2. Дзюблик І.В. Базові питання добровільного консультування і тестування на ВІЛ-інфекцію: Навчальний посібник для лікарів / І.В. Дзюблик – Київ, 2007. – 171 с.

3. Москалюк В.Д. ВІЛ-інфекція/СНІД / В.Д. Москалюк, С.Р. Меленко. –– Чернівці, 2013. – 221 с.

4. Москалюк В.Д. ВІЛ-інфекція: діагностика, лікування, профілактика / В.Д. Москалюк, О.К. Колоскова, Л.А. Іванова, В.Д. Сорохан, С.Р. Меленко –Чернівці, 2013. – 209 с.