К.б.н. Семенов Э.И., к.б.н. Матросова Л.Е., д.б.н. Тремасов М.Я.

ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ») г. Казань

Сравнительная оценка адсорбирующей активности микробных клеток дрожжей в отношении Т-2 токсина

В последнее десятилетие в нашей стране резко обострилась проблема микотоксикозов животных, представляющих собой чрезвычайно высокую экологическую и экономическую опасность. При скармливании животным кормов, контаминированных микотоксинами, регистрируются отдаленные последствия, снижение продуктивности, повышение заболеваемости и массовая гибель животных (Иванов А.В., Тремасов М.Я., Папуниди К.Х., 2008).

Вопросы лечения и профилактики отравлений животных, вызываемых микотоксинами остаются серьезной проблемой в ветеринарной токсикологии. Средства специфической профилактики и лечения, микотоксикозов не разработаны. Наиболее распространенный метод защиты животных от микотоксинов – применение адсорбентов различного происхождения. Идеальным адсорбентом микотоксинов, на наш взгляд, может стать клеточная стенка дрожжей. Дрожжи широко распространенны в различных экологических нишах. Изучение дрожжей и дрожжеподобных грибов является перспективным направлением в биотехнологии. Сейчас дрожжи используются для получения различных ферментных препаратов, органических кислот, полисахаридов, многоатомных спиртов, для очищения окружающей среды от различных поллютантов. Дрожжевые организмы в подавляющем большинстве являются непатогенными. Клеточная стенка дрожжей составляет около 25% сухой массы клетки. Полисахариды клеточной стенки (маннаны, глюкоманнаны) относятся к неперевариваемым. β-(1,6)-глюканы дрожжей являются рецепторами киллер-токсинов, играющих, как известно, важную роль во взаимоотношениях между микроорганизмами (Вагабов В.М., 1988). Дрожжи характеризуются устойчивостью к микотоксинам, что предполагает возможность их использования как в микробиологических методах определения, так и детоксикации.

Целью данной работы была оценка адсорбирующей активности клеточной стенки дрожжей в отношении Т-2 токсина.

Материалы и методы. Объектом исследования являлись различные таксономические группы дрожжей: Saccharomyces serevisiae, Candida krusei, Candida tropicalis, Candida pseudotropicalis, Pichia jadinii, Rhodotorula glutinis, Torulopsis kefir из коллекции штаммов ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ».

Дрожжи поддерживали в аэробных условиях на агаризованной среде Сабуро, содержащей (г/л дистиллированной воды): глюкозу – 10.0, пептон – 10.0, дрожжевой экстракт – 5.0, NaCl – 0.25, агар – 20.0. В последующем из питатательной среды методом многократных центрифугирований и промывок получали взвесь микробных клеток, которую затем высушивали до влажности 10-12% и в дальнейшем использовали для исследований.

Для экспериментальных исследований использовали кристаллический Т-2 токсин, не отличающийся от существующих стандартов, полученный в лаборатории микотоксинов ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Качественное и количественное определение Т-2 токсина проводили хроматографическими методами (ГЖХ). Т-2 токсин является одним из наиболее токсичным и достаточно распространённым трихотеценовых микотоксинов типа А, при этом одним из наименее адсорбируемых (Иванов А.В., Тремасов М.Я., Папуниди К.Х. с соавт., 2008), поэтому его мы и использовали в опыте.

Определение адсорбционной способности сорбентов in vitro при рН=7 (при температуре 37⁰ С, в течение 30 минут) проводили по методике, описанной Курбановой Н.Н. и Семёновым Э.И. (2007) которая учитывает специфику индикации Т-2 токсина и прочность связывания.

Результаты исследований. Результаты изучения адсорбирующей активности различных видов дрожжей в отношении Т-2 токсина представлены в таблице 1.

Таблица - Адсорбирующая активность дрожжей в отношении Т-2 токсина

Исследуемые штаммы	Адсорбция, %	Десорбция, %
Candida krusei	70,6	7,6
Saccharomyces serevisiae	78,8	5,7
Candida tropicalis	62,8	6,1
Candida pseudotropicalis	72,1	4,6
Pichia jadinii	63,7	11,4
Rhodotorula glutinis	59,3	5,7
Torulopsis kefir	47,9	0,67

Из приведённых в таблице данных, следует, что клеточные стенки всех взятых в опыт видов дрожжей обладают в той или иной степени способностью адсорбировать микотоксин Т-2. Так более активно связывали микотоксин микробные клетки дрожжей Saccharomyces cerevisiae (78,8%), рода Candida (62,8-72,1%), менее Torulopsis kefir (47,9%).

Таким образом, образцы адсорбента, содержащие клеточные стенки Saccharomyces cerevisiae, обладают большей эффективностью адсорбции Т-2 токсина, что позволяет их использовать их как кормовая или пищевая добавка для профилактики отравлений микотоксинами.

Литература.

1. Иванов, А.В. Микотоксикозы животных (этиология, диагностика, лечение, профилактика) / А.В. Иванов, М.Я. Тремасов, К.Х. Папуниди, А.К. Чулков – М.: Колос, 2008. – 140 с.

2. Курбанова, Н.Н. Изучение сорбционной способности новых энтеросорбентов в отношении Т-2 токсина in vitro / Н.Н. Курбанова, Э.И. Семенов //Материалы научно-практической конференции молодых ученых и специалистов « Актуальные проблемы ветеринарии» 29 июня 2007 г.- Казань, 2007.-с. 53-54.