Д.б.н. Маловичко Л.В.*, д.б.н. Пронин В.В., д.б.н. Клетикова Л.В.,

д.б.н. Пономарев В.А., к.в.н. Якименко Н.Н., аспирант Бычкова Е.И.**

 

*Российский государственный аграрный университет –

МСХА имена К.А. Тимирязева, Россия

Ивановская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.К. Беляева, Россия

** Шуйский филиала Ивановского государственного университета, Россия

 

ИЗМЕНЕНИЕ ЭНЗИМАТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРИ ТРАВМАХ

У СИНАНТРОПНЫХ ПТИЦ

 

Актуальность исследования.

Современные технологии, компьютеризация и автоматизация многих процессов изменили характер работы клинико-диагностических лабораторий, и особенно это отражается на биохимических исследованиях. Сейчас не вызывает затруднений определение активности целого спектра ферментов, позволяющих установить диагноз и прогнозировать развитие патологического процесса.

Ферменты – это белки специфической природы, которые синтезируются в клетках и катализируют биохимические реакции, происходящие в организме. Существует две группы ферментов плазмы крови, одна из них активно секретируется в плазму крови определенными органами, другая –  высвобождается из клеток во время их нормального функционирования. При многих заболеваниях происходит повреждение клеток, и их содержимое, в том числе и ферменты, высвобождаются в кровь. К причинам, вызывающим высвобождение внутриклеточного содержимого в кровь, можно отнести нарушение проницаемости клеточных мембран или нарушение целостности клеток. Как правило, уровень активности ферментов в плазме коррелирует со степенью повреждения клеток [1].

Ветеринарные специалисты животноводческих и птицеводческих предприятий широко используют энзимодиагностику, позволяющую выявить синдромы болезни на ранней, доклинической стадии [2]. Однако при изучении особенностей  метаболизма у диких и синантропных видов животных и птиц ферментодиагностика практически не используется, хотя и является базисом для глубокого понимания причин нарушения обмена веществ и динамики ряда заболеваний.

Цель и задачи исследования.

Отсутствие в отечественной и зарубежной литературе каких-либо комментариев по определению активности сывороточных ферментов при травмах у птиц, обитателей антропогенных зон, диктует необходимость проследить тенденции в изменении энзиматической активности некоторых маркерных ферментов у синантропных птиц, получивших травмы различной этиологии.

Материалы и методы исследования.

Сыворотку крови получали стандартным методом. Исследование активности ферментов щелочной фосфатазы (ЩФ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), аланинаминотрансферазы (АЛТ) и α-амилазы сыворотки (плазмы) крови птиц проводили на биохимических анализаторах BioCem BA и  BA-88A.

Результаты исследования и их интерпретация.

В осенний период в городе, чаще у водоемов, в парках, садах и скверах можно наблюдать огромное количество птиц, среди которых обращают на себя особое внимание подранки. Среди причин, приводящих к травмам можно отметить нападение более крупных птиц, собак и кошек, выяснение отношение в стае, конкуренция за кормовые ресурсы и место для ночлега.  Наиболее часто нам приходилось сталкиваться с травмами у таких птиц, как сизые чайки (Larus canus), кряковые утки (Anas platyrycha), серые вороны (Corvus cornix), сизые голуби (Columba livia), реже травмы встречались у дрозда-белобровика (Turdus iliacus) и домового воробья (Passer domesticus). У последних двух видов регистрировали вывихи плечевой кости, ушибы, укушенные и рваные раны мягких тканей. Нельзя исключить, что у дроздов и воробьев также часто как и других видов птиц, встречаются травмы, но эти птицы более мелкие и легко становятся добычей для хищников.

При исследовании водоплавающих птиц, получивших травмы, следует отметить, что состояние их всегда тяжелое, так как при невозможности потребления воды и пищи развивается обезвоживание, приводящее к нарушению всех метаболических процессов.

 У Larus canus наиболее часто наблюдали травмы конечностей, как правило, переломы трубчатых костей плечевого пояса и вывихи, а также травмы подъязычного аппарата. Средние значения активности ферментов больных птиц превышали таковые показатели у здоровых, а именно: активность ЩФ – в 5,3 раза, АЛТ – в 1,4; АСТ – в 2,6; амилазы – в 2,3 раза.  Тем не менее, степень метаболического сдвига обусловлена давностью получения травмы: чем больше времени прошло с момента получения травмы, тем активность ферментов была выше, а, следовательно, и степень поражения тканей. Так у сизой чайки с открытым переломом плечевой кости активность АЛТ составила 166,0 ед/л, АСТ – 490,8 ед/л, ЩФ – 473,8 ед/л, амилазы – 5066,5 ед/л. В данном случае степень тяжести патологического процесса коррелирует со скоростью выделения продуктов распада тканей в кровь. Усиление активности ферментов АСТ и АЛТ весьма характерно при переломах костей.

ЩФ является специфическим белком-маркером минерального обмена в костной ткани, скриниговым тестом остеодистрофических процессов [3]. Повышение активности данного фермента в 8 раз свидетельствует о нарушении кальций-фосфорного обмена в костной ткани.

Кроме энзимов, характеризующих  степень поражения костной системы у Larus canus, о тяжести патологического процесса свидетельствует повышение амилолитической активности в 2,5 раза. Это показатель тяжелой дисфункции почечных клубочков.

Особо тяжелым было состояние  Anas platyrycha, у которой отсутствовал правый глаз, повреждены мягкие ткани спины и брюшной области.  У птицы активность щелочной фосфатазы составила 305,3 ед/л (рис. 1), а также отмечались исхудание, загрязнение перьевого покрова, гипотермия, наличие ила и песка в ротовой полости. У утки коэффициент де Ритиса составил 1,036, что, вероятно, обусловлено развитием воспалительных процессов в печени.

 Рис. 1. Активность фермента щелочной фосфатазы при травмах у птиц:

         1 - Larus canus; 2 - Anas platyrycha; 3 - Columba livia; 4 - Corvus cornix

 

Columba livia являются постоянными обитателями урбанизированных территорий: голуби не боятся человека, свободно разгуливают по площадям и обочинам дорог, охотно берут корм из рук горожан. Но частые вспугивания птиц, особенно среди молодняка,  приводят к травмам конечностей. У сизого голубя вывих сопровождается резким энзиматическим сдвигом.

Несмотря на то, что диапазон колебания активности ферментов очень широкий и обусловлен живой массой птиц, характером  потребляемого корма, воздействием стресс-факторов различной интенсивности, местом обитания можно выделить некоторые особенности. У здоровых птиц активность фермента аспартатаминотрансферазы находится в пределах 84,8 ед/л, широта ее изменения в осенний период составила 50,4—113,0 ед/л, у молодняка АСТ при вывихе плечевого сустава повысилась в 4,5 раза. Активность других маркерных ферментов также возросла: АЛТ – в 1,78 раза, щелочной фосфатазы – в 2,5 раза. Активность α-амилазы, также как и у водоплавающих птиц, повысилась, но не столь значительно (рис. 2).

 

 

Рис. 2. Активность α-амилазы у сизого голубя в норме и патологии:

1 – у здоровой птицы; 2 – у птицы, получившей травму

 

Часто получают травмы Corvus cornix, особенно вблизи садовых участков и хозяйств, имеющих стеклянные теплицы. Птицы не видят бликующие на солнце препятствия, пробивают стекло, падая, получают тяжелейшие резаные раны мягких тканей, множественные переломы и зачастую погибают от болевого шока или кровопотери. У здоровых серых ворон средняя активность фермента АСТ составляет 383,9 ед/л, АЛТ – 92,3 ед/л, ЩФ – 290,0 ед/л, амилазы – 1254,0 ед/л. При колото-резаных ранах активность АЛТ возрастает в 2,55 раза, ЩФ – в 1,2 раза, амилазы – в 2,33 раза (рис. 3). Но при этом отмечено снижение активности фермента АСТ в 1,45 раза.

Рис.3. Активность АЛТ у серой вороны в норме (1) и в результате колото-резаной раны в области грудных мышц(2)

Метаболические процессы в скелетных мышцах находятся под контролем множества факторов, при этом мышцы значительно пластичнее и их структурно-метаболический профиль значительно лабильнее при изменении функциональной нагрузки, что, вероятно, объясняется высокой взаимозаменяемостью путей энергетического обмена в мышечной ткани, в отличие от костной ткани.

Выводы.

На основании сравнительного анализа активности некоторых маркерных ферментов у разных видов птиц, получивших травмы в урбанизированной среде, разной этиологии, степени тяжести и времени до проведения исследования можем отметить, что:

1.     тяжесть патологического процесса и энзиматический сдвиг зависит от вида птиц: у водоплавающих птиц концентрация субстрата в сыворотке крови в результате обезвоживания повышается значительно быстрее, что способствует увеличению активности ферментов;

2.     тяжесть патологического процесса коррелирует со временем получения травмы: чем старее травма, тем активность ферментов выше;

3.     при повреждении мышц  активность щелочной фосфатазы меньше, чем при переломах и вывихах костей.

Список литературы:

1.     Биохимия: Учеб. для вузов. Под ред. Е.С. Северина, 2003. – 779 с. Режим доступа: http: //www.biochemistry.ru/biohimija severina/B5873Part21-119.html (дата обращения 04.01.2014).

2.     Клетикова Л.В. Ферменты как маркеры патологии обмена веществ у кур / Л.В. Клетикова // В мире научных открытий, Т.21, №9.4. (Проблемы науки и образования). – Красноярск: Научно-инновационный центр, 2011. – С.1239―1246

3.     Комаров  Ф.И., Коровки Б.Ф., Меньшиков В.В. Биохимические исследования в клинике.  – М.: Элиста: АПП «Джангар», 2001. – 216 с.