А. А. Удод, В. С. Стуликова

Донецкий национальный медицинский университет им. М. Горького МЗО Украины

Патогистологические изменения в пульпе при экспериментальном моделировании пульпита временных зубов

В последнее время миниатюрные свиньи все чаще используются в медицинских экспериментальных исследованиях в качестве лабораторных животных [1]. Это обусловлено большим сходством их анатомического строения и физиологических особенностей сердечно-сосудистой, пищеварительной, выделительной и нервной систем с человеком [2]. Некоторые отличия в строении зубо-челюстной системы, в частности, в количестве временных и постоянных зубов, являются несущественными. У свиньи 32 временных и 44 постоянных зуба, а у человека - лишь 20 и 32, соответственно. Данные животные широко применяются для моделирования ряда заболеваний человека и методов их лечения, однако данных относительно экспериментальных и морфологических исследований воспаления пульпы временных зубов нет.

Цель работы: изучить патогистологические изменения при экспериментальном моделировании пульпита временных зубов вьетнамской вислобрюхой свиньи.

Объект и методы исследования. Для проведения экспериментального исследования было получено разрешение комиссии по биоэтике факультета ветеринарной медицины Национального университета биоресурсов и природоиспользования Украины. Все исследования проводили согласно требованиям Конвенции Совета Европы относительно защиты прав животных (в том числе избавление от жажды, голода, недоедания, дискомфорта, страха, боли, болезней), в соответствии с Законом Украины «О защите животных от жестокого обращения» и заключением Европейской комиссии об обращении с позвоночными животными [3]. Для экспериментального исследования было отобрано 13 свиней в возрасте 1 месяца, что соответствует 4 годам человека. Средняя масса тела животных составляла 6,66±0,75 кг. У каждого животного использовали группу временных резцов (всего 52 зуба) и премоляров нижней челюсти (всего 26 зубов). В месячном возрасте корни зубов находились в сформированном состоянии.

Под общим обезболиванием путем катетеризации ушной вены животного, которую проводили с применением препарата "Комбистрес" из расчета 0,25 мл раствора на 1кг массы тела и препарата "Бутомидор" в той же дозировке [4], шаровидным алмазным бором с постоянным охлаждением дистиллированной водой капельным методом из шприца формировали кариозные полости небольшого диаметра 5 класса по Блеку во временных резцах и 1 класса во временных премолярах нижней челюсти в пределах околопульпарного дентина, далее с помощью К-файла перфорировали внутризубные полости. Через неделю проводили эвтаназию животного путем передозировки препарата "Пропофол" до полной остановки дыхания во время внутривенной инъекции в ушную вену и сепарировали блоки нижней челюсти. Полученные препараты фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Декальцинацию проводили с применением 5% раствора муравьиной кислоты на дистиллированной воде, образцы для удаления остатков декальцинирующей смеси в течение 24 часов промывали проточной водой и заливали в целлоидин-парафин. Срезы препаратов толщиной 7-15 мкм получали с помощью санного микротома с применением одноразовых коммерческих ножей. Полученные срезы окрашивали гематоксилином Караци и эозином [5]. Гистологические препараты изучали под микроскопом MCX 100led производства фирмы Micros (Австрия) под увеличениями от 50 х до 1000 х и фотографировали с помощью фотоаппарата Canon EOS 550d.

В ходе патогистологического исследования пульпы временных зубов вьетнамской вислобрюхой свиньи при моделировании экспериментального пульпита были установлены следующие изменения. В верхней части коронки зуба в участке созданного дефекта преобладали изменения, характерные для фазы альтерации. Часть полости коронки, непосредственно прилегающая к перфорационному отверстию в дентине, была пустой (не содержала никаких тканей). Центральный и часть периферического слоя пульпы здесь были некротизированы и пропитаны гемоглобином разрушенных эритроцитов. Регистрировали выраженную пролиферацию фибробластов. В то же время, количество пучков коллагеновых волокон в этом участке пульпы было заметно меньшим. Также обнаружили очаги некроза одонтобластов, в то время, как в других участках регистрировали пролиферацию этих клеток. Новообразованные одонтобласты еще не имели типичного микроскопического строения, они характеризовались заметно меньшим объемом цитоплазмы и гиперхромным базофильным ядром, которое располагалось в центральной части клетки. Такая реакция одонтобластов, вероятно, была проявлением регенеративных процессов в ответ на повреждение пульпы зуба. В пульпе в области шейки и апикальной части корня зуба микроскопические изменения были несколько иными. В центральном и промежуточном слоях пульпы регистрировали значительно расширенные и полнокровные капилляры, а также выраженную пролиферацию фибробластов, значительное утолщение пучков коллагеновых волокон и достаточно равномерную и плотную инфильтрацию пульпы клетками воспаления (моноцитами, нейтрофилами, лимфоцитами и одиночными эозинофилами). Местами регистрировали тесные контакты между разными клетками воспаления и относительно большие очаговые скопления лимфоцитов. Кроме того, в центральном слое пульпы выявили очаги отека разных размеров и формы. Такая реакция иммунокомпетентных клеток, по нашему мнению, свидетельствовала об ответе иммунной системы на антигенное раздражение. Возможно, пролиферация фибробластов и гиперпродукция пучков коллагеновых волокон возникали, как компенсаторно-приспособительный процесс, направленный на уменьшение проницаемости пульпы с целью ограничения распространения патологического процесса.

Таким образом, в результате исследования установлено, что патогистологические изменения в пульпе временных зубов вьетнамской вислобрюхой свиньи при моделировании пульпита идентичны изменениям в пульпе человека. Это может служить обоснованием данной экспериментальной модели для изучения эффективности применения лекарственных препаратов при лечении данного заболевания [6].

Литература

1. Тихонов В. Н. Формирование генофонда миниатюрных сибирских свиней «Минисибс» и их использование в медико-генетических исследованиях / В. Н. Тихонов // Генетика. - 2000. - Т. 36. - N 6. - С. 829–836.

2. Tikhonov V. N. The Siberian Miniature pig, its development, genetics, and use in biomedical research / V. N. Tikhonov // Advances in swine in biomedical research. - 1996. - Vol. 2. - P. 693–707.

3. Закон України про захист тварин від жорстокого поводження (Відомості Верховної Ради України (ВВР), 2006, N 27, ст. 230) http://zakon0.rada.gov.ua/laws/show/3447-15

4. Пламб Д. К. Фармокологические препараты в ветеринарной медицине / Д. К. Пламб, перевод с англ. Осипова Е. И. - М.: Аквариум ЛТД, 2002. – 855 с.

5. Горальський Л. П. Основи гістологічної техніки і морфофункціональні методи дослідження у нормі та при патології / Л. П. Горальський, В. Т. Хомич, О. І. Кононський. – Житомир.: «Полісся», 2011. – 288 с.

6. Терапевтическая стоматология детского возраста / [Л. А. Хоменоко,Ю. Б. Чайсковская, А. В. Савичук и др.]. – Киев: Книга плюс, 2007. – 813с.