А.
А. Удод, В. С. Стуликова
Донецкий
национальный медицинский университет им. М. Горького МЗО Украины
Патогистологические
изменения в пульпе при экспериментальном моделировании пульпита временных зубов
В последнее время миниатюрные свиньи
все чаще используются в медицинских экспериментальных исследованиях в качестве
лабораторных животных [1]. Это обусловлено большим сходством их анатомического
строения и физиологических особенностей сердечно-сосудистой, пищеварительной,
выделительной и нервной систем с человеком [2]. Некоторые отличия в строении зубо-челюстной системы, в частности, в количестве временных
и постоянных зубов, являются несущественными. У свиньи 32 временных и 44
постоянных зуба, а у человека - лишь 20 и 32, соответственно. Данные животные
широко применяются для моделирования ряда заболеваний человека и методов их
лечения, однако данных относительно экспериментальных и морфологических
исследований воспаления пульпы временных зубов нет.
Цель
работы: изучить патогистологические изменения при экспериментальном
моделировании пульпита временных зубов вьетнамской вислобрюхой свиньи.
Объект и методы
исследования. Для проведения экспериментального
исследования было получено разрешение комиссии по биоэтике факультета
ветеринарной медицины Национального университета биоресурсов и природоиспользования Украины. Все исследования проводили
согласно требованиям Конвенции Совета Европы относительно защиты прав животных
(в том числе избавление от жажды, голода, недоедания, дискомфорта, страха,
боли, болезней), в соответствии с Законом Украины «О защите животных от
жестокого обращения» и заключением Европейской комиссии об обращении с позвоночными
животными [3]. Для
экспериментального исследования было отобрано 13 свиней в возрасте 1 месяца,
что соответствует 4 годам человека. Средняя масса тела животных составляла
6,66±0,75 кг. У каждого животного использовали группу временных резцов (всего
52 зуба) и премоляров нижней челюсти (всего 26
зубов). В месячном возрасте корни зубов находились в сформированном состоянии.
Под общим обезболиванием путем катетеризации ушной вены животного,
которую проводили с применением препарата "Комбистрес"
из расчета 0,25 мл раствора на 1кг массы тела и препарата "Бутомидор" в той же дозировке [4], шаровидным алмазным
бором с постоянным охлаждением дистиллированной водой капельным методом из
шприца формировали кариозные полости небольшого диаметра 5 класса по Блеку во временных резцах и 1 класса во временных премолярах нижней челюсти в пределах околопульпарного
дентина, далее с помощью К-файла перфорировали внутризубные
полости. Через неделю проводили эвтаназию животного путем передозировки
препарата "Пропофол" до полной остановки
дыхания во время внутривенной инъекции в ушную вену и сепарировали блоки нижней
челюсти. Полученные препараты фиксировали в 10% растворе нейтрального
формалина. Декальцинацию проводили с применением 5% раствора муравьиной кислоты
на дистиллированной воде, образцы для удаления остатков декальцинирующей смеси в
течение 24 часов промывали проточной водой и заливали в целлоидин-парафин. Срезы
препаратов толщиной 7-15 мкм получали с помощью санного микротома с применением
одноразовых коммерческих ножей. Полученные срезы окрашивали гематоксилином Караци и эозином [5]. Гистологические препараты изучали под
микроскопом MCX 100led производства фирмы Micros
(Австрия) под увеличениями от 50 х до 1000 х и фотографировали с помощью
фотоаппарата Canon EOS 550d.
В ходе патогистологического
исследования пульпы временных зубов вьетнамской вислобрюхой свиньи при
моделировании экспериментального пульпита были установлены следующие изменения.
В верхней части коронки зуба в участке созданного дефекта преобладали изменения,
характерные для фазы альтерации. Часть полости коронки, непосредственно
прилегающая к перфорационному отверстию в дентине, была пустой (не содержала
никаких тканей). Центральный и часть периферического слоя пульпы здесь были некротизированы и пропитаны гемоглобином разрушенных
эритроцитов. Регистрировали выраженную пролиферацию фибробластов. В то же
время, количество пучков коллагеновых волокон в этом участке пульпы было
заметно меньшим. Также обнаружили очаги некроза одонтобластов,
в то время, как в других участках регистрировали пролиферацию этих клеток.
Новообразованные одонтобласты еще не имели типичного
микроскопического строения, они характеризовались заметно меньшим объемом
цитоплазмы и гиперхромным базофильным
ядром, которое располагалось в центральной части клетки. Такая реакция одонтобластов, вероятно, была проявлением регенеративных процессов
в ответ на повреждение пульпы зуба. В пульпе в области шейки и апикальной части
корня зуба микроскопические изменения были несколько иными. В центральном и
промежуточном слоях пульпы регистрировали значительно расширенные и
полнокровные капилляры, а также выраженную пролиферацию фибробластов,
значительное утолщение пучков коллагеновых волокон и достаточно равномерную и
плотную инфильтрацию пульпы клетками воспаления (моноцитами, нейтрофилами,
лимфоцитами и одиночными эозинофилами). Местами регистрировали тесные контакты
между разными клетками воспаления и относительно большие очаговые скопления
лимфоцитов. Кроме того, в центральном слое пульпы выявили очаги отека разных
размеров и формы. Такая реакция иммунокомпетентных клеток, по нашему мнению,
свидетельствовала об ответе иммунной системы на антигенное раздражение.
Возможно, пролиферация фибробластов и гиперпродукция
пучков коллагеновых волокон возникали, как компенсаторно-приспособительный процесс,
направленный на уменьшение проницаемости пульпы с целью ограничения распространения
патологического процесса.
Таким образом, в результате
исследования установлено, что патогистологические изменения в пульпе временных
зубов вьетнамской вислобрюхой свиньи при моделировании пульпита идентичны изменениям
в пульпе человека. Это может служить обоснованием данной экспериментальной модели
для изучения эффективности применения лекарственных препаратов при лечении
данного заболевания [6].
Литература
1. Тихонов
В. Н. Формирование генофонда миниатюрных сибирских свиней «Минисибс»
и их использование в медико-генетических исследованиях / В. Н. Тихонов //
Генетика. - 2000. - Т. 36. - N 6. - С. 829–836.
2.
Tikhonov V. N. The Siberian Miniature
pig, its development, genetics, and use in biomedical research / V. N. Tikhonov // Advances in swine in biomedical research. -
1996. - Vol. 2. - P. 693–707.
3.
Закон
України про захист тварин від жорстокого поводження (Відомості Верховної Ради
України (ВВР), 2006, N 27, ст. 230) http://zakon0.rada.gov.ua/laws/show/3447-15
4.
Пламб
Д. К. Фармокологические препараты
в ветеринарной медицине / Д. К. Пламб, перевод с англ. Осипова Е. И. - М.: Аквариум
ЛТД, 2002. – 855 с.
5.
Горальський Л. П. Основи гістологічної техніки і морфофункціональні
методи дослідження у нормі та при патології / Л. П. Горальський,
В. Т. Хомич, О. І. Кононський. – Житомир.: «Полісся»,
2011. – 288 с.
6. Терапевтическая стоматология детского возраста / [Л.
А. Хоменоко,Ю. Б. Чайсковская,
А. В. Савичук и др.]. – Киев: Книга плюс, 2007. –
813с.