Биологические науки /2.Структурная ботаника и биохимия растений

Коляда И.А., к.х.н. Бойкова О.И., к.х.н. Швыкин А.Ю.,

к.ф-м.н. Родионова О.В., к.п.н. Ситникова Л.Д.

Тульский государственный педагогический университет им. Л.Н. Толстого, Россия

Содержание кумаринов в семенах каштана конского обыкновенного, произрастающего в Тульской области

Препараты из плодов и листьев конского каштана широко используются в медицине для лечения тромбозов, при варикозном расширении вен, геморрое, флебитах язвах голени. В народной медицине его применяют при заболевании желчного пузыря, для лечения суставного ревматизма [1].

С XVI века каштан конский обыкновенный Aesculus hippocatanum L., естественно произрастающий на Балканском полуострове, путём ступенчатой акклиматизации и селекции успешно введен в культуру стран Западной и Восточной Европы [2]. В настоящее время эта порода используется для озеленения населённых пунктов и в Тульской области.

Цель работы заключается в качественном и количественном определении кумаринов в семенах каштана конского, произрастающего в Тульской области в местах обитания с различным антропогенным воздействием.

В качестве объекта исследования использовались семена каштана конского урожая 2016 г., собранные на территории Тульской области в г. Тула в Центральном районе, г. Киреевск, г. Богородицк, г. Щекино, п. Петелино Тульской области (всего 15 образцов). Одни образцы семян собирались с деревьев, произрастающих на участках с минимальной антропогенной нагрузкой (в скверах и парках или около детских садов), другие - с участков с высоким антропогенным воздействием (около автомобильных дорог или около жилых домов). Семена собирались в сухую погоду в период созревания, во второй половине сентября.

Для качественного обнаружения кумаринов в семенах каштана проводили лактонную пробу и при этом наблюдали окрашивание спиртового извлечения в желтый цвет. Также проводили реакцию образования азокрасителя, для чего к продуктам лактонной пробы добавляли 1 мл свежеприготовленного диазореактива и наблюдали изменение окраски раствора с желтого на красно-вишневый. Все исследуемые образцы дали положительные результаты на наличие кумаринов.

Количественное определение содержания кумаринов в пересчете на ангелицин выполняли спектрофотометрическим методом на спектрофотометре СФ-2000. 0,5 г сырья (точная масса) поместили в колбу емкостью 100 мл и прибавили 50 мл 96% спирта этилового, содержащего 1% концентрированной хлористоводородной кислоты. Содержимое колбы кипятили с обратным холодильником в течение 30 минут, после кипячения полученное извлечение фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в этиловом спирте и количественно переносили в мерную колбу вместимостью 25 мл, затем доводили тем же растворителем до метки. 2,5 мл полученного извлечения переносили в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводили до метки спиртом, после чего тщательно перемешивали. Оптическую плотность полученного раствора измеряли при длине волны 270 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения – спирт этиловый 96%.

В качестве стандартного образца использовали СО ангелицина. Для этого 0,1 г СО ангелицина (точная навеска) поместили в мерную колбу вместимостью 50 мл и растворили в 40 мл спирта этилового 96%, после чего содержимое колбы доводили до метки тем же растворителем (раствор А). 1мл раствора А переносили в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводили объем раствора до метки тем же растворителем. Оптическую плотность полученного раствора измеряли при длине волны 270 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения – спирт этиловый 96% Количественное содержание кумаринов в 1 мл извлечения рассчитывали по формуле:

где: A₀ и A_x – значения оптических плотностей растворов СО ангелицина и анализируемогообразца соответственно; а₀ – масса навески СО ангелицина, г; W₀ и W_x – мерные колбы, использованные для разведения навесок СО ангелицина и анализируемой аликвоты соответственно, мл; V_a0 и V_ax – аликвоты растворов СО и анализируемого образца соответственно, мл; В – влажность сырья.

Нашими исследованиями установлено, что содержание кумаринов в пересчете на ангелицин в образцах семян каштана конского изменяется от 2.50% до 9,69%. Из полученных данных установлено, что наибольшая концентрация кумаринов зафиксирована в семенах каштана конского, собранных с деревьев, произрастающих в скверах или около детских садов, т.е. в местах с меньшим антропогенным воздействием, чем в образцах с деревьев, произрастающих на участках около автомобильных дорог или около жилых домов с интенсивной антропогенной нагрузкой. Так содержание в семенах каштана кумаринов, собранных в условно более чистой зоне выше в 1,2-1,6 раза, чем в семенах каштана с более загрязнённых участков.

Таким образом, удалось установить, что экологическое благополучие места произрастания растения оказывает существенное влияние на концентрацию кумаринов в семенах каштана конского, произрастающего в Тульской области.

Литература:

1. Касьянов Т.И., Русанова Л.А., Квасенков О.И., Нематуллаев И. Технология переработки плодов и листьев каштана конского / Известия ВУЗов. Пищевая технология. – 1996. - №5-6. – Стр. 86-87.

2. Мазнев Н.И. Энциклопедия лекарственных растений. 3-е изд., испр. и доп. — М.: Мартин 2004. – С. 496.