Биологические науки /2.Структурная ботаника и биохимия растений

Коляда И.А., к.х.н. Бойкова О.И.

Тульский государственный педагогический университет им. Л.Н. Толстого, Россия

Количественное определение полисахаридов в семенах каштана конского, произрастающего в Тульской области

Среди разнообразных классов природных соединений все чаще внимание исследователей привлекает класс полисахаридов. Биологически активные растительные полисахариды применяются в медицинской практике для профилактики и лечения ряда заболеваний различной этиологии. Полисахариды являются потенциальными модификаторами биохимических реакций - противоопухолевыми средствами, обладают противоязвенным, обволакивающим, мягчительным и отхаркивающим действием [1].

В продолжении работ по изучению химического состава каштана конского, произрастающего в Тульской области в местах обитания с различным антропогенным воздействием, целью данного исследования явилось количественное определение полисахаридов в семенах каштана.

В качестве объекта исследования использовались семена каштана конского урожая 2016 г., собранные на территории Тульской области в г. Тула в Центральном районе, г. Киреевск, г. Богородицк, г. Щекино, п. Петелино Тульской области (всего 15 образцов). Одни образцы семян собирались с деревьев, произрастающих на участках с минимальной антропогенной нагрузкой (в скверах и парках или около детских садов), другие - с участков с высоким антропогенным воздействием (около автомобильных дорог или около жилых домов). Семена собирались в сухую погоду в период созревания, во второй половине сентября.

Количественное содержание полисахаридов определяли гравиметрическим способом для этого аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Далее около 5,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл воды, колбу присоединяют к обратному холодильнику и кипятят при перемешивании на электрической плитке в течение 30 минут. Экстракцию водой повторяют еще два раза по 50 мл в течение 30 минут каждый раз. Объединенные водные извлечения центрифугируют с частотой вращения 5000 об/мин в течение 10 минут и декантируют в мерную колбу вместимостью 500 мл через 5 слоев марли, вложенной в стеклянную воронку и предварительно смоченной водой. Фильтр промывают водой и доводят объем раствора водой до метки (раствор А). 25 мл раствора А помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 100 мл спирта этилового 96%, перемешивают, подогревают на водяной бане при температуре 60⁰С в течение 5 минут. Через 30 минут содержимое центрифугируют с частотой вращения 5000 об/мин в течение 30 минут. Надосадочную жидкость фильтруют под вакуумом при остаточном давлении 13-16 кПа через высушенный до постоянной массы при температуре 100-105⁰С стеклянный фильтр ПОР 16 диаметром 40 мм. Затем осадок количественно переносят на тот же фильтр и промывают 15 мл смеси спирта этилового 96% и воды (3:1). Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре 100-105⁰C до постоянной массы.

Содержание полисахаридов в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

(m₂ -m₁ ) × 500 × 100 × 100

X, % = ---------------------------------- , где

m × 25 × (100-W)

m₁ – масса фильтра в граммах; m₂ – масса фильтра с осадком в граммах; m – масса сырья в граммах; W – потеря в массе при высушивании сырья в процентах [2].

Нашими исследованиями установлено, что содержание полисахаридов в образцах семян каштана конского изменяется от 30,10% до 41,50%. Из полученных данных установлено, что наибольшая концентрация полисахаридов зафиксирована в семенах каштана конского, собранных с деревьев, произрастающих в скверах или около детских садов, т.е. в местах с меньшим антропогенным воздействием, чем в образцах с деревьев, произрастающих на участках около автомобильных дорог или около жилых домов с интенсивной антропогенной нагрузкой. Так содержание в семенах каштана полисахаридов, собранных в условно более чистой зоне выше в 1,1-1,3 раза, чем в семенах каштана с более загрязнённых участков.

Таким образом, проведено выделение полисахаридного комплекса из семян каштана конского, произрастающего в Тульской области и определено его количественное содержание гравиметрическим методом.

Литература:

1. Cоболева В.А., Чушенко В.Н., Коломиец А.А. Данькевич О.С. Выделение комплекса полисахаридов каштана конского и изучение его химического состава / Провизор. – 2009. - №16. – [Электронный ресурс] - http://provisor.com.ua/archive/2009/N16/kahkon_169.php?art_code=7254&part_code=14- свободный доступ.

2. Постоюк Н. А., Маркарян А. А., Даргаева Т. Д., Сокольская Т. А. Методика количественного определения суммы аминокислот в листе каштана конского обыкновенного [Текст] // Новые задачи современной медицины: материалы Междунар. науч. конф. (г. Пермь, январь 2012 г.). — Пермь: Меркурий, 2012. — С. 139-141. — URL https://moluch.ru/conf/med/archive/51/1503/ (дата обращения: 21.12.2017).