Н.с. П.А.Шукюрова, К.б.н. Х.Ф.Бабаев

Институт физиологии им. А.И.Караева НАН Азербайджана, г. Баку.

ВОЗМОЖНОСТЬ РЕТИНОПРОТЕКЦИИ ЭКСТРАКТОМ ШАФРАНА (Crocus sativus L.) В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ДИСТРОФИИ СЕТЧАТКИ

Последнее десятилетие ознаменовано тем, что поиск, выявление, изучение и получение новых, эффективных препаратов из лекарственного растительного сырья все ещё остается актуальной проблемой современной фармакологии и медицины. Уникальность этих препаратов состоит в высоком трофическом потенциале входящих в состав веществ, при полном отсутствии у них химической чужеродности, токсичности и других побочных эффектов. Кроме того, помимо биологически активных веществ, растения содержат сопутствующие соединения, повышающие всасываемость и ускоряющие усвоение основных действующих веществ, оказывая, таким образом, положительное влияние на проявление терапевтического действия. Также естественные метаболиты растений способны адаптироваться к системам транспорта через клеточную мембрану, при этом специфическое воздействие на конкретную систему, влияние на различные звенья патологического процесса, не вызывает сдвига в функционировании других обменных процессов организма по типу цепной реакции (2).

Настоящее исследование посвящено изучению влияния экстракта из рылец шафрана посевного (Crocus sativus L.) на реакции свободнорадикального окисления (СРО) и электрическую активность сетчатки при её экспериментальной дистрофии, созданной на глазах 12 половозрелых кроликов породы «шиншилла», массой 2,5-3,5 кг. В работе были использован эндемический шафран, выращенный в поселке Бильгя Апшеронского полуострова. Спиртовой экстракт рылец шафрана был приготовлен следующим образом: 5г сухих измельченных рылец шафрана подвергали спиртовому экстрагированию 75%-ным этиловым спиртом и выдерживали в течение 2-х дней на холоду, постоянно перемешивая с помощью магнитной мешалки. Полученный спиртовой раствор фильтруют, остаток промывают 75% спиртом и снова фильтруют, затем перегонкой отгоняли спирт. Полученное жидкое извлечение под вакуумом сгущали до сухого остатка, при температуре 40-50ºС. Выход активного экстракта по отношению к исходному сырью – около 56% вязкого смолообразного вещества. 0,5% раствор экстракта рылец шафрана приготовляли на физиологическом растворе. В качестве стабилизатора и консерванта полученной лекарственной формы использовался нипагин.

Экспериментальную модель токсической дистрофии создавали путем внутривенного введения раствора монойодуксусной кислоты (МЙУК) в дозе 5 мг/кг (средняя степень повреждения сетчатки). Степень поражения сетчатки оценивали по уровню её биоэлектрической активности, определяемой методом электроретинографии (ЭРГ). ЭРГ регистрировали в условиях адаптации к темноте до введения МЙУК (интактные значения), а также через 1, 5, 10, 15 и 20 суток после её введения. Животные опытной группы на протяжении всего эксперимента получали ежедневные однократные парабульбарные инъекции 0,5%-ного водного раствора экстракта шафрана. Животные контрольной группы получали соответствующие инъекции стерильного физиологического раствора.

Результаты проведенных биохимических исследований свидетельствуют о том, что развитие экспериментальной дистрофии сетчатки происходит на фоне выраженного «окислительного стресса» (1). Это характеризуется повышением свободнорадикального окисления в исследуемых тканях сетчатки. Показатели ПОЛ в контрольной группе были достоверно выше, чем в опытной группе. Уровень малонового диальдегида (МДА) в сетчатке животных контрольной группы был повышен почти в 2,3 раза (рис.1). При местном применении 0,5%-ного раствора экстракта шафрана в сетчатке животных наблюдается снижение уровня МДА, что свидетельствует о стабилизации различных метаболических и регуляторных систем организма, направленных на усиление компенсаторных механизмов и как результат на устранение повреждения тканей при данной патологии сетчатки.

Рис.1. Содержание малонового диальдегида (нмоль/мг белка) в тканях сетчатки кроликов при её экспериментальной дистрофии на фоне введения экстракта шафрана.

Примечание: *- p <0,05 при сравнении с интактным контролем, °- p <0,05, при сравнении с контрольной группой.

При проведении электроретинографических исследований в опытной группе животных, которым вводили парабульбарно экстракт шафрана, было выявлено умеренное угнетение ретинальной функциональной активности, а именно заметное замедление снижения амплитуды «а» и «b» волн ЭРГ (таб.1). Это может быть свидетельством определенного улучшения функционального состояния сетчатки на фоне проводимой экспериментальной терапии 0,5% раствором экстракта шафрана. По-нашему мнению, это связано с фармакологическим действием составляющих компонентов шафрана (4).

Так в составе экстракта содержатся натуральные антиоксиданты в форме витамина А и его предшественников (каротин (a,b,g), витамина С, витаминов группы В, каротиноидов: кроцин, пикокроцин, кроцетин являются основным компонентом антиоксидантной защиты сетчатки глаза (3). Из 20 видов аминокислот, имеющихся в организме, шафран содержит несколько свободных, в том числе незаменимых, которые, достраивая нарушенную структуру компонентов АО системы, способствует её реактивации.

Таблица 1.

Влияние экстракта шафрана на изменение амплитудных параметров ЭРГ сетчатки кроликов с экспериментальной дистрофией сетчатки средней тяжести

Группы животных	Дни опыта	Амплитуда «α» волны		Амплитуда«b» волны
		мкв	%	мкв	%
Интактная		100,0±5,5	100%	118,0 ± 5,8	100%
С экспериментальной дистрофией сетчатки (n=5) (контроль)	5	70,0±13,6*	62%	98,0 ± 11,6*	73%
	10	52,0±5,6	51%	88,0± 3,6	62%
	15	38,0±1,9***	46%	60,0 ± 7,05***	51%
	20	40,0±4,5***	40%	48,0±4,89***	41%
С экспериментальной дистрофией сетчатки +экстракт шафрана (n=5) (опыт)	5	86,0±2,43°	86%	72,0 ± 4,89***°	72%
	10	98,0±11,6*	88%	78,0 ± 4,7	72%
	15	116,0±7,47*	98%	84,0 ± 4,0 ***°°	72%
	20	116,0 ±5,09 *	116%	102,0 ± 9,68*°°°	86%

Примечание. Достоверное различие:

* р<0,05, ** р<0,01, *** р<0,001- при сравнении с интактным контролем;

° р<0,05, °° р<0,01,°°° р<0,001- при сравнении с контрольной группой.

В связи с этим можно предположить, что введение экстракта шафрана может оказать умеренное ретинопротекторное и нейропротекторное воздействие, положительно влияя на фоторецепторы сетчатки. Результаты наших исследований продемонстрировали, что экстракт шафрана при экспериментальной дистрофии средней тяжести оказывает стимулирующее действие на дистрофически измененную сетчатку, на биохимические процессы, происходящие в ней, проявляющееся в ретинопротекторном действии на её рецепторный аппарат. Одним из возможных механизмов ретинопротекторного действия шафрана является прямой механизм действия, через проявление антиоксидантных свойств. Так, шафран, как биоантиоксидант, препятствуя окислению ПНЖК фосфолипидов биомембран, предотвращает мембранодеструктивные процессы в фоторецепторах и инактивацию мембраносвязанных ферментных комплексов, увеличивает стабильность липидного слоя мембран. На фоне этих процессов происходит стабилизация и других биохимических показателей в глазу. Так, по данным наших исследований улучшаются показатели функциональной активности сетчатки. Таким образом, при лечебном действии экстракта шафрана антиокислительная функция играет важную роль, что позволяет прогнозировать его дальнейшее использование в практической медицине, как эффективного лекарственного средства для лечения дегенеративных изменений сетчатки.

Литература.

1. Дубинина Е.Е., Пустыгина А.В. Свободнорадикальные процессы при старении, нейродегенеративных заболеваниях и других патологических состояниях // Биомедицинская химия, 2007, Т. 53, C.351-372.

2. Несруллаева, Т.М., Гусейнов С.К., Касумова Х.Х., Абдуллаева И.М. Эффективность водного раствора цветков шафрана при атеросклеротических макулодистрофиях / I межд. конф. «Клинические исследования лекарственных средств», Москва, 2001, С. 124.

3. Abdullaev, F.J. Cancer chemo preventive and tumoricidal properties of saffron (Crocus sativus L.)// Exp.Biol.Med., 2002, №247, P. 20-25.

4. Shukurova P.A., Babaev R.A. Antioxidant effects of saffron ekstract in rat retina under dystrophy / 28^th internetional Horticulture Congress “Science and horticulture for people”, volume II, (Symposia), Lisbon, 2010, p.355.