Табурец О.В., Гринченко О.О., Дворщенко К.О.

Киевский национальний университет им. Тараса Шевченка, Киев, Украина

УНЦ «Институт бмологии и медецины»

Влияние новой фармакологической композиции на основе меланина на активность супероксиддисмутазы и каталазы в сыворотке крови крыс при резаной ране

Выявление новых фармакологических субстанций и их комбинаций, эффективно стимулирующих заживление кожных ран, по-прежнему актуально [1,2]. Одним из основных аспектов состоятельности репаративной регенерации является выраженность процессов свободнорадикального окисления. В условиях полнослойной раны свободнорадикальные процессы приобретают особенно агрессивный характер, что, посредством активации процессов липопероксидации, оказывает существенное влияние на функциональную активность клеточных и субклеточных структур.

В связи с этим, проблема изучения механизмов коррекции активности ферментов антиоксидантной системы при резаной ране является актуальной [4].

Нашими предыдущими исследованиями доказано, что предложенная фармакологическая композиция на основе меланина, продуцентом которого являются черные антарктические дрожжеподобные грибы Nadsoniellanigra штам X1-M, при пероральному применении проявляют цитопротекторные, стресопротекторные, радиопротекторные, антиоксидантные, противовоспалительные и противоопухлевые свойства [5].

Целью даной работы было изучение влияния фармакологической композиции на основе меланина на активность антирадикальных ферментов в сыворотке крови в динамике заживления экспериментальных резаных ран.

Исследования проведены на 105 крысах-самцах массой 200–250 г. Животные были разделены на четыре группы: интактные –1-я группа, с экспериментальным раной без лечения – 2-я группа, леченые карбополом (препарат сравнения) –3 группа, лечение фармакологической композицией – 4-я группа.  Модель полнослойной резаной раны была сформирована в межлопаточной области спины под тиопенталовым наркозом посредством иссечения кожного лоскута с подкожной клетчаткой в виде квадрата размером 1×1 см по контуру, предварительно нанесенному по трафарету [6].

Иследованную композицию наносили на кожу два раза в день, начиная с первого дня моделирования раны и до полного заживления раны. Животных выводили из эксперимента в соответствии с правилами биоэтики на 3, 6, 14 сутки и в день полной эпителизации кожного дефекта. Активность ферментов антиоксидантной системы оценивали по содержанию каталазы  методом, основанном на способности перекиси водорода образовывать с солями молибдена стойкий окрашенный комплекс [7] и супероксиддисмутазы (СОД) с использованием нитросинего тетразолия [8]. 

Иследование супероксиддисмутазной активности в сыворотке крови животных с резаной раной показало, что на всех этапах раневого процесса этот показатель уменьшался относительно показателей интактных животных (рис.1). 

 

Рис.1. Супероксиддисмутазная активность в сыворотке крови крыс при резаной ране, (М ± m, n=7)

                  *-р≤0,05 достоверность различий с интактными животными ; #- р≤0,05 достоверность

                   различий с   контролем

 

При использовании фармакологической композиции супероксиддисмутазная активность в сыворотке крови повышалась по сравнении с контролем; при лечении карбополом наблюдали также повышение этого показателя.

 Показано повышение каталазной активности в сыворотке крови крыс на первых этапах раневого процесса: на 14 сутки данный показатель оставался без изменений, во время полной эпителизации раны – уменьшался в 1,4 раза относительно интактных животных (рис.2). При применении фармакологической композиции на основе меланина каталазная активность  возростала на 14 сутки в 2,1 раза, в день полного закрытия раны – в 1,6 раза в сравнении с животными с патологией. В группе животных, которым наносили карбопол, каталазная активность на 3, 6, 14 сутки, а также при полной эпителизации раны.

 

Таблица 1. Каталазная активность в сыворотке крови крыс при резаной ране,

 (М ± m, n=7)

      *-р≤0,05 достоверность различий с интактными животными ; #- р≤0,05 достоверность

  различий с   контролем

 

Таким образом, под действием фармакологической композиции на основе меланина повышается уровень АО защиты организма и увеличивается скорость эпителизации раны. Прирост активности КАТ в середине периода наблюдения соответствует восстановлению ее активности в результате прекращения поступления токсинов и естественной детоксикации. Динамика активности СОД и КАТ в более поздние сроки отражает восстановление защитных механизмов АОС в результате лечения и благоприятного течения заболевания.

 

 

Литература:

1.  Акмаев И.Г. Современные представления о взаимодействиях регулирующих систем: нервной, эндокринной и иммунной// Успехи физиол. наук. – 1996. Т. 27, №1. С. 3-20.

2.  Бердюгина О.В. Иммунологическое прогнозирование в травматологии и ортопедии. - Екатеринбург: ИздатНаукаСервис, 2009. – 251 с.

3.  Oxidative stress involment in schizophrenia pathophysiology:a review/C. Fendri, A. Mechri, G. Khiari [et al.] // Encephale. – 2006. – Mar -Apr. - Vol. 32. - P. 244 — 252.

4.  Oxidative stress and anti-oxidative mobilization in burn injury/A. Parihar,  M.S. Parihar, S. Milner, S. Bhat // Burns. – 2008. – Vol. 34(1). – P. 6-17.

5.  Вплив меланіну на стан слизової оболонки шлунка та реакцію гіпоталамо-гіпофізарно-наднирковозалозної осі за умов дії гострого стресу / Д. В. Голишкін, Т. М. Фалалєєва, К. С. Непорада, Т. В. Бере­гова // Фізіологічний журнал. - 2015. - Т. 61, № 2. - С. 65-72.507

6.  The effect of magnetic fields on wound healing. Experimental study and review of the literature / Henry S.L., Concannon M.J., Yee G.J. // Open Access Journal of Plastic Surgery. – 2008. – Vol 8. – p.393-399

7.  Барабой В.А. Методические особенности исследования перекисного окисления/ В.А. Барабой, В.Э. Орел, И.М. Карнаух // Перекисное окисление и радиация.- Киев: "Наук. Думка, 1991.- С. 52-75.

8.  Королюк М.А., Иванова Л.И.,  Майорова  И.Г.,Токарев В.Е Метод  определения  активности  каталазы //  Лабораторное дело. - 1988. - Вып. 1. - С. 16-18