докторант Абай Г., д.с.х.н., профессор Алибаев Н.Н.

Южно-Казахстанский государственный университета им.М.Ауезова, г.Шымкент, Республика Казахстан.

Получение сухого гонадотропина

Проведено сравнительное изучение активности препаратов нативной СЖК и сухого ГСЖК с соотношением ФСГ и ЛГ 3:1, 2:1, 1:1, полученных от 3-8 летних доноров кобыл со сроком 58-64 дней жеребости в зависимости от продолжительности их хранения.

Анализ экспериментальных данных и научно-производственных опытов подтверждают различия в активности между разными препаратами гонадотропина, хранившимися в одних и тех же условиях. При этом, установлена степень активности гормонального препарата сухого ГСЖК и нативной СЖК после первого, второго и третьего годов хранения (таблица 1).

Таблица 1 – Активность препаратов ГСЖК и СЖК в зависимости от сроков их хранения

в процентах

Препарат	Срок хранения препарата, год	Кол-во флаконов	Активность препарата
			высокая	средняя	низкая
ГСЖК сухой	1	35	100,0	-	-
	2	57	100,0	-	-
	3	54	94,4	5,6	-
Всего		146	97,9	2,1	-
СЖК нативная	1	29	100,0	-	-
	2	35	45,7	37,2	17,1
	3	38	15,8	31,6	52,6
Всего		102	47,0	27,5	25,5
Разница			+50,9	-25,4	-25,5

Исследования показали, что новый высушенный препарат ГСЖК свою стопроцентную высокую активность сохраняет до трех лет с минимальным понижением на третий год (5,6%). В среднем, высокая и средняя активности сухого ГСЖК в течение трех лет составила 97,9±1,2 и 2,1±1,2 соответственно.

Подобные исследования были проведены и с препаратами нативной СЖК. Особенно резко снижал гормональную активность нативной СЖК в связи с продолжительностью хранения. Этот препарат обладал существенно низкой активностью по сравнению с препаратами сухого ГСЖК. Стопроцентная активность у данного препарата установлена до одного года. На второй год гормональная активность снизилась на 45,7% и, напротив, повысилась средняя и низкая активность на 37,2% и 17,1% соответственно. Минимальное отклонение в активности было установлено после трех лет хранения, где уменьшение активности составило от 15,8% до 52,6%.

Сохранность высокоактивных свойств сухого ГСЖК в течение трех лет выше на 50,9%, чем нативная СЖК. Разница между сравниваемыми препаратами статистически недостоверна (Р<0,001). На основании полученных данных об изменении биологической активности традиционного препарата СЖК установлено, что гонадотропное свойство теряется после первого года хранения, что экономически невыгодно. Эти исследования свидетельствуют о более длительной сохранности биологического свойства сухого ГСЖК, чем нативного СЖК.

Подтверждением этому является дисперсионный анализ влияния длительности хранения на активность препарата разного качества. При этом, влияние срока хранения на активность препарата сухого ГСЖК составило всего-навсего 7,7% и доля влияния оказалась очень низкой (ŋ²=0,037±0,013) и недостоверной (Р>0,05). Наоборот, доля влияния разных сроков хранения СЖК на их активность высокая (ŋ²=0,461±0,011) и достоверна с вероятностью Р<0,001. Предел влияния длительности хранения препарата на их активность не менее 42,7% и не более 49,5%, что больше на 41,8% по сравнению с препаратом ГСЖК.

Наряду с изучением влияния продолжительности хранения данных препаратов на их активность также нами исследованы их степень насыщенности и истощения цвета в зависимости от продолжительности выдержки биопродукта в разные сроки. В результате проведенных опытов был разработан критерий визуальной оценки качества гормонального препарата.

Установлено, что продолжительное хранение существенно влияет на исходный цвет препарата. При этом, первоначальный цвет препарата сухого ГСЖК в течение трех лет почти не изменился и находился в пределах от 100,0% до 88,9% (таблица 2).

Таблица 2 – Влияние продолжительности хранения ГСЖК на исходный их цвет

в процентах

Препарат	Срок хранения препарата, год	Кол-во флаконов	Цвет препарата
			светло-белый	белый	пожелтев-ший
ГСЖК сухой	1	35	100,0	-	-
	2	57	100,0	-	-
	3	54	88,9	11,1	-
Всего		146	95,9	4,1	-

Наоборот, интенсивность цветового тона препарата нативного СЖК, начиная со второго года хранения, обесцвечивался от исходного темного тона до светлого. Степень истощения интенсивности цвета СЖК снизилась после первого года хранения на 37,1%, после второго года - на 60,5%. Степень обесцвечивания до светлого тона составила в пределах от 8,6% до 28,9% (таблица 3).

Таблица 3 – Влияние продолжительности хранения нативного СЖК на исходный их цвет

в процентах

Препарат	Срок хранения препарата, год	Кол-во флаконов	Цвет препарата
			темный	средний	светлый
СЖК нативный	1	29	100,0	-	-
	2	35	62,9	28,6	8,6
	3	38	39,5	31,6	28,9
Всего		102	64,7	21,6	13,7

В целом, наблюдения показали, что процесс истощения стандартного тона цвета препарата нативного СЖК в течение трех лет усиливается на 31,2%, чем сухого ГСЖК. Разница высокодостоверна (Р<0,001). При этом доля влияния срока хранения на специфический оттенок препарата СЖК составила ŋ²=0,257±0,015 с достоверностью F=17,1.

Следовательно, доверительные границы главного фактора – срока хранения на обесцвечивание исходного цвета СЖК может составить в пределах от 21,1% до 30,3%. Также установлено, что в зависимости от степени истощения и насыщенности цветового тона разных препаратов их биологическая активность становится не стойкой. Особенно этот процесс существенно заметен при истощении исходного цвета препарата СЖК. Например, при процессе истощения исходного цвета СЖК до среднего тона процент высокой активности снижается до 13,6% и наоборот повышается доля низкоактивных препаратов на 54,5% (таблица 4).

Таблица 4 – Биологическая активность ГСЖК и СЖК в зависимости от степени насыщенности цвета препарата

в процентах

Препарат	Степень насыщенности цвета препарата	Кол-во флаконов	Активность препарата
			высокая	средняя	низкая
ГСЖК сухой	светло-белая	140	100,0	-	-
	белая	6	83,3	16,7	-
Всего		146	99,3±0,7	0,7±0,7	-
СЖК нативная	темная	66	100,0	-	-
	средняя	22	13,6	31,8	54,5
	светлая	14	-	-	100,0
Всего		102	67,6±4,6	6,9±2,5	25,5±4,3
Разница			+31,7	-6,2	-25,5

Стопроцентный неактивный препарат обнаружен при обесцвечивании исходного цвета до светлого тона. Дисперсионный анализ подтверждает высокодостоверное влияние на устойчивость исходного цвета препарата СЖК в разные годы хранения и составил ŋ²=0,868±0,003. Причем доля влияния изученного фактора на активность препарата СЖК доходит до 87,7%. Эти результаты дают основание о необходимости учета изменения исходного цвета препарата, используемого при индукции суперовуляции у доноров.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

1. Бекетауов О., Алибаев Н.Н., Адилбеков Н. Биологические свойства СЖК в зависимости от дней жеребости донора-продуцента //Проблемы экологии, аридного кормопроизводства и животновотсва в Казахстане: матер. межд. науч.-практ. конф.-Шымкент: 2009. -С.221-222

2. Алибаев Н., Бекетауов О. Сущность проблемы сохранения генетических ресурсов каракульской породы овец, Алматы, 2002, №12, С.11-12.

3. Saint-Dizier V., Chopineau M., Dupont J., Daels P.F., and Combarnous Y. Expression and binding activity of luteinizing hormone/chorionic gonadotropin in the primary corpus luteum during early pregnancy in the mare.// Biology of reproduction. – 2003. – v. 69 – p. 1743-1749.

4. Allen W.R. The origin of the equine endometrial cups. I. production of PMSG by fetal trophoblast cells. W.R. Allen., R.M. Moor// J. Reprod. Feprod. Fertil. – 1972. – v.29. – p.313-316.

5. Pigoniowa H. Badahia nad wydzielaniem hormonow gonadotropowich u z’rebnych caozy. //Med. Weler. – 1962. – v.6 – p. 361-363.