Ветеринария / 1.

асп. Якимчук Е.А.¹, д.в.н., проф. Анников В.В.¹, д.т.н., проф., член-корреспондент РАЕ Родионов И.В.², студ. Пигарева Ю.В.¹

¹ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова», Россия

²ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный технический университет имени Гагарина Ю.А.», Россия

Обоснование целесообразности применения кафорсена при переломах длинных трубчатых костей животных

Вопросам травматизма домашних животных в настоящее время уделяется пристальное внимание. Большую актуальность данной проблеме придает тот факт, что перелом костей вызывает травматическую болезнь (Ватников Ю.А., 2004). Одной из основных систем, в первую очередь реагирующей на действие повреждающего фактора, является иммунная система. Исследованиями отечественных ученых (Бабаева А.Г., Зотиков Е.А., 1987; Ватников Ю.А., 2004; Донцов В.И., 1998 и др.) установлено, что при использовании препаратов, влияющих на активность клеток иммунной системы, можно добиться сокращения сроков консолидации костных отломков и более раннему восстановлению ее показателей.

Исследованиями Карповой А.И. (2011) было доказано, что гомеопатический препарат кафорсен при его применении у травматологически больных животных ведет к ранней нормализации кальций-фосфорного соотношения и, как следствие, ускоренному восстановлению анатомической целостности трубчатых костей животных и их вовлечение в локомоторный процесс.

В связи с этим была поставлена цель – провести оценку состояния органов иммунитета (красный костный мозг, лимфатические узлы, селезенка) при костной травме на фоне применения кафорсена.

Для проведения исследований были отобраны две группы кроликов породы «белый венский» в возрасте 6 месяцев по принципу аналогов по четыре головы в каждой группе. Животным под нейролептаналгезией выполнялся флексионный перелом костей голени. На 3-и сутки экспериментальным кроликам устанавливался аппарат внешней стержневой фиксации. Всем животным проводили превентивную антибиотикотерапию и санацию чрескостных стержневых остеофиксаторов. Опытной группе кроликов дополнительно вводился кафорсен в дозе 1мл внутримышечно в течение 10 дней клинического эксперимента. На 30 сутки исследования животные выводились из эксперимента.

Из костномозгового канала по общепринятой методике аспирировался костный мозг. Несколько его капель наносилось на предметное стекло и приготавливались мазки (по пять мазков от каждого животного). Мазки высушивались на воздухе, фиксировались в этиловом спирте в течение 30 мин. Окраска проводилась по Май-Грюнвальду с докраской ядер по Романовскому. Покрашенные таким образом мазки просматривались под иммерсионной системой. Для установления гистологической картины иммунотропных органов отбирались подколенные лимфатические узлы с обеих конечностей и селезенка. Для этого указанные органы помещали в 10%-й водный нейтральный раствор формалина. На замораживающем микротоме модели 2515 Reichert Wien готовились гистологические срезы толщиной 15 мкм. Приготовленные срезы окрашивались гематоксилином и эозином. Микроскопическое исследование проводилось при различной степени увеличения: в 50, 100, 150 и 300 крат.

Таблица

Показатели костного мозга кроликов (n=4, М±m).

Показатели		Опытная группа	Контрольная группа
Миелобласты, %		1,3±0,3	0,8±0,3
Миелоциты, %		11,5±0,9	7,5±0,3
Метамиелоциты, %		13,0±1,1	10,8±0,5
Палочкоядерные псевдоэозинофилы, %		11,0±1,2	12,3±0,9
Сегментоядерные псевдоэозинофилы, %		18,8±0,9	21,5±1,7
Эозинофилы, %		1,3±0,3	1,8±0,5
Моноциты, %		2,3±0,3	2,5±0,3
Лимфоциты, %		16,0±2,2	16,0±0,7
Эритробласты, %		0,8±0,3	1,5±0,
Нормоциты, %	Базофильные	3,8±0,3	4,3±0,5
	Полихроматофильные	16,0±1,0	14,5±0,7
	Оксифильные	3,5±0,3	3,3±0,3
Индекс лейко/эритро (ИЛЭ)		1,5±0,1	1,4±0,1

В опытной группе среднее количество миелобластов, миелоцитов и метамиелоцитов (1,3±0,3%, 11,5±0,9%, 13,0±1,1% соответственно) существенно превышало аналогичные показатели у животных контрольной группы (0,8±0,3%, 7,5±0,3%, 10,8±0,5% соответственно) (табл.). При этом среднее количество палочкоядерных и сегментоядерных псевдоэозинофилов (ПЯПЭ и СЯПЭ) у кроликов опытной группы составило 11,0±1,2% и 18,3±0,9% соответственно. У животных контрольной группы эти показатели были на уровне 12,3±0,9% и 21,5±1,7%. Это свидетельствует о расширение белого ростка крови в опытной группе на уровне миелобластов, миелоцитов и метамиелоцитов. У животных контрольной группы расширение белого ростка происходило за счет ПЯПЭ и СЯПЭ.

Увеличение количества ПЯПЭ и СЯПЭ говорит о функциональном угнетении костного мозга, что наблюдалось у животных контрольной группы, в то время как в опытной группе его функциональная активность была не нарушена.

Уровень эозинофилов и моноцитов у животных отличался незначительно: в опытной группе он составлял 1,3±0,3% и 2,3±0,3% соответственно, в контрольной группе – 1,8±0,5% и 2,5±0,3% соответственно.

Среднее количество лимфоцитов у животных опытной и контрольной групп составило 16,0±2,2% и 16,0±0,7% соответственно (табл.).

Уровень эритробластов у животных опытной группы составил 0,8±0,3%, а у животных контрольной группы – 1,5±0,3%. Это, возможно, говорит об угнетении гемопоэза у животных обеих групп вследствие костной травмы. Среднее количество базофильных нормоцитов в обеих группах находилось на следующем уровне: 3,8±0,3% – в опытной группе, 4,3±0,5% – в контрольной группе.

Количество полихроматофильных нормоцитов в опытной группе составило 16,0±1,0%, в контрольной группе – 14,5±0,7%. Среднее количество оксифильных нормоцитов в опытной группе составило 3,5±0,3%, в контрольной группе – 3,3±0,3%.

По соотношению клеток красной и белой крови (ИЛЭ) можно судить о наличии в организме животных либо воспаления (при расширении белого ростка крови на уровне зрелых клеточных форм), либо анемии при расширении красного ростка крови). В опытной группе животных данный индекс составил 1,5±0,1, что говорит о существенном снижении воспалительных процессов в области перелома, так как увеличение этого индекса связано с расширением белого ростка на уровне миелобластов, миелоцитов и метамиелоцитов. В контрольной группе ИЛЭ составил 1,4±0,1, что свидетельствует о присутствии в организме животных этой группы воспалительных процессов в месте перелома.

При гистологическом исследовании лимфатических узлов травмированной конечности животных контрольной группы были отмечены следующие явления: тинкториальные свойства ткани не нарушены, лимфоидное вещество размещено компактно, хорошо заметны герминативные центры, лимфатические фолликулы имели средние размеры, наблюдался незначительный отек стромы органа, но выраженный в синусах, отмечено полнокровие и гиперплазия лимфоидного вещества.

При микроскопировании гистосрезов лимфатических узлов противоположной, нетравмированной конечности выявлено сохранение структуры органа, компактное расположение лимфоцитов, лимфатические фолликулы имели средние размеры, в единичных фолликулах была умеренная макрофагальная реакция, незначительный отек стромы, умеренный отек паренхимы и синусов, гиперплазия лимфоидного вещества.

Микроскопия гистосрезов лимфоузлов травмированной конечности животных опытной группы выявила тонкую фиброзную капсулу, не инфильтрованную окружающую жировую клетчатку, сохраненную картину строения, хорошо выраженные лимфатические фолликулы с наличием в них герминативных центров, незначительный отек стромы органа.

При исследовании лимфатических узлов с левой нетравмированной конечности наблюдались тонкая фиброзная капсула, сохраненная картина строения органа, лимфоидные фолликулы средних и мелких размеров со светлыми центрами, незначительный отек синусов.

Гистологическая картина селезенки животных контрольной группы выглядела следующим образом: фиброзная капсула местами была утолщена, расположение лимфоидной ткани было компактным, красная пульпа умеренно кровенаполнена, наблюдался отек стромы органа и сосудов, было незначительное количество мелких лимфоидных фолликулов, лимфоидные элементы характеризовались различной степенью зрелости.

У животных опытной группы наблюдалась тонкая фиброзная капсула, лимфоидные фолликулы имели средние размеры с нечеткими границами, красная пульпа была кровенаполнена, лимфоидные элементы представлены с различной степенью зрелости.

В заключении можно сказать, что применение препарата кафорсен при костной травме не влияет отрицательно на лейкопоэз костного мозга и не вызывает в нем дегенеративные изменения. У травмированных животных при гистологическом исследовании органов иммунной системы сохраняется гиперплазия лимфатических узлов, свидетельствующая о наличии реакции иммунной системы на травму. Присутствие герминативных центров говорит о функциональной активности лимфатических узлов. Отек стромы и синусов органов также трактуется как последствие травматической болезни. Незначительные различия в гистологической картине органов иммунной системы животных обеих групп указывает на отсутствие токсического влияния кафорсена на иммунотропные органы.

Литература

1. Карпова А.И. Клинико-морфологическое обоснование эффективности применения кафорсена при переломах трубчатых костей у животных. Дис. … канд. вет. наук, - Саратов, 2011. – 133с.

2. Бабаева А.Г., Зотиков Е.А. Иммунология процессов адаптивного роста, пролиферации и их нарушений // М.: Наука, 1987. – 207с.

3. Ватников Ю.А. Структурная и функциональная организация репаративного остеогенеза животных // М.: Франтера. – 2004. – 144с.

4. Донцов В.И. Регуляция лимфоцитами клеточного роста соматических тканей и новая иммунная теория старения // Профилактика старения. – 1998. - №1. – С. 94-96.