Лушникова О.В., Пурсанов К.А.
ИЗМЕНЕНИЕ АКТИВНОСТИ АМИНОТРАНСФЕРАЗ
ПРИ ДЕЙСТВИИ ЗООТОКСИНОВ В УСЛОВИЯХ НОРМОТЕРМИИ
И В ПОСТГИПЕРТЕРМИЧЕСКИЙ ПЕРИОД
Нижегородская государственная медицинская академия,
Россия
Как известно, аминотрансферазы, или
трансаминазы, - ферменты класса трансфераз, катализирующие обратимые реакции
трансаминирования, т.е. перенос аминогруппы (-NH2) и
водорода от одной молекулы субстрата к другой без промежуточного образования
аммиака. Коферменты аминотрансферазы – пиридоксальфосфат и пиридоксаминофосфат.
Аминотрансферазы участвуют в азотистом обмене, особенно в обмене аминокислот.
Определение аланиновой и аспарагиновой аминотрансфераз в сыворотке крови
человека используют в диагностике заболеваний печени и сердца [1].
Наибольшее клинико-диагностическое
значение имеет определение активности двух аминотрансфераз:
аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ).
Аспартатаминотрансфераза широко распространен в органах и тканях человека.
Наибольшее содержание АСТ обнаружено в сердечной мышце, затем последовательно в
убывающем количестве в печени, скелетной мускулатуре, головном мозге, почках,
семенниках [2]. Наиболее высокая активность АЛТ обнаруживается в печени,
поджелудочной железе, сердце и скелетной мускулатуре. В печени активность АЛТ в
несколько тысяч раз выше, чем в сыворотке крови.
Повышение активности аминотрансфераз в
сыворотке крови отмечено при целом ряде заболеваний и, особенно при поражении
органов и тканей, богатых данными ферментами (печень, миокард и др.). Наиболее
резкие изменения в активности АСТ наблюдаются при поражении сердечной мышцы [1].
Большинство зоотоксинов, в том числе
пчелиный яд и яд щитомордника, обладают кардиотропным и гепатотропным действием
[3], в связи с чем был поставлен ряд
экспериментов с оценкой изменений активности АЛТ и АСТ при действии пчелиного
яда и яда щитомордника в условиях гипертермии и в постгипертермический период.
Работа была выполнена на 60 белых
лабораторных крысах-самцах массой 200±10 г, содержащихся на общем рационе вивария.
В работе использовались яд пчелы
медоносной (Apis mellifera L.) и яд
щитомордника восточного (Agkistrodon blomhoffii Boie).
Определение активности аланин- и аспартатаминотрансфераз производилось
колориметрическим методом по Умбрайт и Равайя [4].
Статистическая обработка
экспериментальных данных была выполнена с помощью программы «Биостат». Для
сравнения нескольких групп использовали критерий Стьюдента [5].
Активность аланинаминотрансферазы у
интактных животных в течение 24 часов достоверно не изменяется, оставаясь в
пределах 0,089 – 0,094 мкмоль ПВК/ч∙мл (рис. 1).
При внутрибрюшинном введении
физиологического раствора в объёме 1 мл в условиях нормотермии показатели АЛТ в
течение 24 часов практически не меняются, оставаясь на уровне 0,078 – 0,085 мкмоль ПВК/ч∙мл (рис.
1).
Введение пчелиного яда в дозе 2 мг/кг в
условиях нормотермии (20°С) сопровождалось резким увеличением активности АЛТ
через 1 час после введения яда с последующим постепенным снижением к 24 часам,
оставаясь, однако выше контрольных величин (рис. 1).
Активность АЛТ в постгипертермический
период на фоне предварительного введения пчелиного яда в дозе 2 мг/кг
достоверно не отличалась от контрольных величин (рис. 1).
Рис. 1. Влияние пчелиного яда на активность АЛТ в
условиях
нормотермии и в постгипертермический период
1 –
интактная группа (контроль)
2 - физ. раствор в условиях
нормотермии
3 - пчелиный яд (2 мг/кг) в
условиях нормотермии
4 - физ. раствор в условиях
гипертермии (50°С, 30 мин)
5 –
пчелиный яд (2 мг/кг) в условиях гипертермии (50°С, 30 мин)
´ - Различия между контрольной и экспериментальными группами
статистически значимы (р≤ 0,05)
# - Различия
между контрольной группой и группой
пчелиный яд в условиях нормотермии
статистически значимы (р≤ 0,05)
● - Различия между контрольной группой и группой пчелиный яд в условиях гипертермии статистически значимы
(р≤ 0,05)
Определение активности АЛТ в
постгипертермический период на фоне введения физиологического раствора
показало, что уровень активности АЛТ достоверно не отличается от контроля при
нормотермии (рис. 1).
Активность АСТ у интактной и контрольной групп животных в течение суток после тепловой экспозиции
достоверно не отличаются друг от друг, оставаясь в пределах 0,116 – 0,148
мкмоль ПВК/ч∙мл (рис. 2).
Рис. 2. Влияние пчелиного яда на активность АСТ в
условиях
нормотермии и
в постгипертермический период
1 –
интактная группа (контроль)
2 - физ. раствор в условиях
нормотермии
3 - пчелиный яд (2 мг/кг) в
условиях нормотермии
4 - физ. раствор в условиях
гипертермии (50°С, 30 мин)
5 – пчелиный яд (2 мг/кг) в
условиях гипертермии (50°С, 30 мин)
´ - Различия между контрольной и экспериментальными группами
статистически значимы (р≤ 0,05)
# - Различия
между контрольной группой и группой
пчелиный яд
в условиях нормотермии статистически значимы (р≤ 0,05)
* - Различия между контрольной группой
и группой пчелиный яд
в условиях гипертермии статистически значимы (р≤
0,05)
Введение физиологического раствора с
последующей тепловой экспозицией (50°С) в течение 30 мин сопровождалось
достоверным повышением активности АСТ
только через 24 часа после гипертермии (рис. 2).
Активность АСТ как при нормотермии, так
и при тепловой экспозиции на фоне
введения пчелиного яда достоверно отличалась от контрольных величин (рис. 2).
При введении яда щитомордника в условиях
нормотермии отмечается максимальная активность АЛТ, достоверно отличающаяся от
контрольных величин. Во всех остальных сериях экспериментов достоверных отличий
между группами не обнаружено (рис. 3).
Рис. 3. Влияние яда щитомордника на активность АЛТ в
условиях
нормотермии и в постгипертермический период
1 –
интактная группа (контроль)
2 - физ. раствор в условиях
нормотермии
3 – яд щитомордника (4
мг/кг) в условиях нормотермии
4 - физ. раствор в условиях
гипертермии (50°С, 30 мин)
5 – яд щитомордника (4
мг/кг) в условиях гипертермии (50°С, 30 мин)
# - Различия между контрольной группой и группой яд щитомордника
в условиях нормотермии статистически значимы (р≤ 0,05)
● - Различия между экспериментальными
группами и группой яд щитомордника в условиях гипертермии статистически значимы
(р≤ 0,05)
Активность АСТ достоверно отличается от
контрольных величин только в серии, в которой яд щитомордника в дозе 4 мг/кг
вводится в условиях нормотермии. Следует заметить, что в постгипертермическом
периоде активность АСТ через 24 часа достоверно выше, чем при введении яда
щитомордника в условиях нормотермии.
Таким образом, при введении пчелиного яда
и яда щитомордника в условиях нормотермии активность АЛТ и АСТ повышается. При
совместном применении ядов и высокой внешней температуры показатели АЛТ не
отличаются от контрольных величин, показатели АСТ в постгипертермическом
периоде при введении пчелиного яда превышают показатели контрольной группы, а
при введении яда щитомордника не отличаются от контрольных величин.
Этот эффект, возможно, связан с
перераспределением воды в условиях гипертермии. Это подтверждается данными,
полученными при анализе показателей гематокрита с введением физиологического
раствора и тепловой экспозицией в течение 30 мин. Так, в условиях нормотермии
показатель гематокрита соответствовал 46±0,4%, а при перегревании он снижался
до 40±0,4%, что говорит о всасывании воды в кровеносное русло из межтканевого
пространства [6].
Литература
1. Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., Меньшиков
В.В. Биохимические исследования в клинике.- Элиста: АПП «Джангар», 2001.
2. Кочкина В.М. Аспартатаминотрансфераза.
– М.: Медицина, 1995.
3. Данилова О.О. Модификация гепарином
токсических и термопротекторных свойств зоотоксинов // Автореф. дисс. на
соискание уч. степ. к.б.н. Н. Новгород, 2008. – 24 с.
4. Федянин Ю.П., Патеюк В.Г. Влияние
гепарина на некоторые ферменты переаминирования в сыворотке крови больных
эпидемическим гепатитом. Гепарин. Физиология, биохимия, фармакология и
клиническое применение. Материалы III Всесоюзной
конференции. М., 1973. С. 312-314.
5. Гланц Стентон.
Медико-биологическая статистика. - М.: Практика, 1999.
6. Пурсанов К.А., Хомутов А.Е., Лушникова
О.В. Изменение показателей красной крови при действии зоотоксинов в условиях
гипертермии и в постгипертермический период. Медицинский альманах, 2009. №
1(6). С. 124-126.