Данников С.П., д.б.н. Квочко А.Н.

Ставропольский государственный аграрный университет, Россия

Постнатальный морфогенез проксимального отдела нефрона нутрий

Проксимальный каналец является самым крупным, а его высокие клетки построены наиболее сложно, по сравнению с другими отделами нефрона. Для них характерно наличие щеточной каемки, внутриклеточных мембран и большого числа правильно ориентированных митохондрий [4]. В просвете проксимального канальца обратно реабсорбируется около 60% электролитов, более 90% бикарбонатов и воды, а также здесь происходит реабсорбция глюкозы, аминокислот и мелкодисперсных белков [2].

В процессе постнатального развития человека и животных проксимальные канальцы, как и все остальные элементы нефрона, подвержены целому спектру морфофункциональных изменений [1].

Несмотря на развитие современной нефрогонологии в литературе отсутствуют сведения о морфологических характеристиках постнатального развития различных элементов нефрона нутрий.

Цель настоящей работы – изучить динамику изменения ядерно-цитоплазматического отношения (ЯЦО) клеток и диаметра проксимальных канальцев нутрий в постнатальном онтогенезе.

Объектом исследования служили 30 клинически здоровых самок и самцов нутрий стандартного окраса следующих возрастных групп: 1 сутки, 2 месяца, 4,5 месяца, 7,5 месяцев и 1 год жизни.

Для выполнения экспериментальной части исследований проводили убой нутрий и изъятие почек и с учетом их топографии отбирали пробы для гистологических исследований.

Материал, взятый для гистологических исследований, фиксировали в 10%-ном водном растворе нейтрального формалина, проводили через спирты возрастающей крепости и ксилол, а затем заливали в гистологическую среду «Гистомикс» с использованием гистологического процессора замкнутого типа Tissue-Tek VIP™ 5 Jr. производства Sakura (Япония).

После заливки кусочки органов фиксировали на стандартные гистологические кассеты, затем делали гистосрезы толщиной 5-7 мкм.

Гистосрезы окрашивали гематоксилином и эозином согласно рекомендациям В.В. Семченко с соавт. (2006) [3].

С каждого препарата почек, выполняли по 10 цифровых снимков (в формате .jpg, размером 3136×2352 пикселей в палитре 24 бит), случайно выбранных полей зрения при увеличении 400. Исследовали диаметр проксимальных канальцев (10 измерений в каждом снимке), площадь клеток и ядер проксимальных канальцев (10 измерений в каждом снимке) с помощью программы Видео-Тест Морфология 5.1 для Windows.

Статистическую обработку данных проводили в программе Primer of Biostatistics 4.03 для Windows. Достоверными считали различия при (p<0,05).

В результате исследований установлено, что диаметр проксимальных канальцев у самок и самцов нутрий с возрастом увеличивается, проявляя при этом, разную степень достоверных различий обусловленных возрастом, половой принадлежности и топографией почек (табл.1.).

Таблица 1.

Диаметр проксимальных канальцев у нутрий разных

половозрастных групп (n=30), мкм2

Возраст

Самки, M±m

Самцы, M±m

Левая почка

Правая почка

Левая почка

Правая почка

1 сутки

24,61±0,16

23,20±0,15

23,42±0,14

21,92±0,15

2 месяца

27,49±0,19*

28,12±0,19*

27,80±0,21*

27,39±0,19*

4,5 месяца

32,27±0,22*

29,76±0,22*

32,05±0,22*

33,06±0,23*

7,5 месяцев

33,94±0,15*

33,53±0,18*

34,75±0,17*

33,38±0,22

1 год

35,92±0,18*

35,06±0,20*

36,11±0,17*

38,98±0,27*

Примечание: статистическая значимость различий с более ранним возрастом: *p<0,05.

С 1-го дня и до 2-х месяцев жизни диаметр проксимальных канальцев у самок нутрий в левой и правой почке достоверно (p<0,05) возрастает на 11,7 и 21,2%, а у самцов – на 18,7 и 25,0%, соответственно. В возрасте 4,5 месяцев жизни этот показатель у самок в левой и правой почке достоверно (p<0,05) увеличивается на 17,4 и 5,8%, а у самцов – на 15,3и 20,7%, по сравнению с 2-х месячными особями. С 4,5 и до 7,5 месячного возраста достоверное увеличение диаметра проксимальных канальцев регистрируется у самок в левой и правой почке на 5,2 и 12,7%, а у самцов достоверное (p<0,05) увеличение этого показателя выявлено только в левой почке (на 8,4%). Достигая возраста 1 года жизни, диаметр проксимальных канальцев у самок нутрий в левой и правой почке достоверно (p<0,05) возрастает на 5,8 и 4,6%, а у самцов значение этого показателя увеличивается на 3,9 и 16,8%, по сравнению с 7,5 месячными особями.

Ядерно-цитоплазматическое отношение в клетках проксимальных канальцев, отражающее их функциональную активность, с возрастом изменяется волнообразно и имеет тенденцию к снижению (табл.2.).

Таблица 2.

Ядерно-цитоплазматическое отношение в клетках проксимальных канальцев нутрий разных половозрастных групп (n=30)

Возраст

Самки, M±m

Самцы, M±m

Левая почка

Правая почка

Левая почка

Правая почка

1 сутки

0,272±0,003

0,292±0,003

0,297±0,003

0,281±0,004

2 месяца

0,221±0,003*

0,219±0,003*

0,219±0,002*

0,217±0,003*

4,5 месяца

0,208±0,002*

0,220±0,003

0,217±0,003

0,219±0,002

7,5 месяцев

0,218±0,002*

0,221±0,003

0,188±0,002*

0,190±0,002*

1 год

0,162±0,002*

0,185±0,002*

0,177±0,002*

0,188±0,002

Примечание: статистическая значимость различий с более ранним возрастом: *p<0,05.

С рождения до 2-х месяцев жизни ЯЦО клеток проксимальных канальцев у самок нутрий достоверно (p<0,05) снижается в левой и правой почке на 23,1 и 33,3%, а у самцов на – 35,6 и 29,5%, соответственно. В возрасте 4,5 месяцев жизни достоверное снижение значений этого показателя, по сравнению с предыдущим возрастом, выявлено только в левой почке у самок нутрий (на 6,3%, p<0,05). С 4,5 и до 7,5 месячного возраста значение ЯЦО клеток проксимальных канальцев у самок нутрий достоверно увеличивается только в левой почке (на 4,8%, p<0,05), при этом у самцов значение этого показателя в левой и правой почке достоверно (p<0,05) уменьшается на 15,4 и 15,3%, соответственно. В возрасте 1 года ЯЦО клеток проксимальных канальцев у самок нутрий в левой и правой почке достоверно (p<0,05) уменьшается на 34,6 и 19,5%,по сравнению с предыдущим возрастом, а у самцов достоверно снижение этого показателя регистрируется только в левой почке (на 6,2%, p<0,05).

Таким образом, в результате проведенных нами исследований установлено, что диаметр проксимальных канальцев у самок и самцов нутрий с возрастом увеличивается, а функциональная активность их клеток, по ядерно-цитоплазматическому отношению, изменяется волнообразно, имеет тенденцию к снижению к годичному возрасту и зависит от пола животного и топографии почек.

 

Литература:

1.                     Длоуга Г., Кршечек И., Наточин Ю.В. Онтогенез почки. – Л.: Наука, 1981. – 184 с.

2.                     Нефрология. Под ред. Е.М. Шилова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. – 688 с.

3.                     Семченко В.В. Барашкова С.А. Ноздрин В.Н. Артемьев В.Н. Гистологическая техника: Учебное пособие. – 3-е изд. доп. и перераб. – Омск – Орел: Омская областная типография, 2006. – 290 с.

4.                     Серов В.В. Морфологические основы иммунопатологии почек (нефрит, нефроз). – М.: Медицина, 1968. – 328 с.