Медицина/15. Неонатология

Эстрин В.В., Долотова Л.Ф.

НИИ акушерства и педиатрии, Россия

г. Ростов-на-Дону

Влияние селеназы на активность некоторых антиоксидантных ферментов сыворотки крови у новорожденных с синдромом дыхательных расстройств (СДР) находящихся на ИВЛ

Синдром дыхательных расстройств (СДР), по данным ВОЗ, на протяжении последних лет, занимает одно из ведущих мест, в структуре заболеваемости и перинатальной смертности как среди доношенных, так и среди недоношенных детей. Причем эта патология превалирует не только в нашей стране, но и за рубежом [1, 2, 3]. Экспериментальными исследованиями показано, что одним из основных патогенетических факторов развития СДР является усиленное образование активных форм кислорода (reactive oxygen species, ROS), азота (reactive nitrogen species, NOS) и связанное с этим перекисное окисление липидов [4, 5]. Кроме того, оксидативный стресс, при СДР, может усиливаться проведением оксигенотерапии [6]. В связи с чем, применение у новорожденных с СДР находящихся на ИВЛ, препаратов обладающих антиоксидантными свойствами (АОС) является приоритетным. Целью исследования явилось улучшение результатов лечения новорожденных с СДР и перинатальным поражением ЦНС (ПП ЦНС), находящихся на искусственной вентиляции легких (ИВЛ), путем использования селена в виде пентагидрата селенита натрия - препарат СЕЛЕНАЗА (Selenase ^®, Biosyn, Германия). Материалы и методы исследования: для решения поставленной задачи на базе реанимационного отделения ФГБУ Ростовского НИИ акушерства и педиатрии МР, с соблюдением этических норм, было проведено контролируемое рандомизированное слепое клиническое испытание применения селеназы у новорожденных находящихся в критических ситуациях. Обследовано 76 новорожденных с СДР (родившихся в крайне тяжелом и тяжелом состоянии, с оценкой по шкале Апгар 3,1 ± 1,2 балла, в сроке гестации 39,1 ± 1,1 неделя, массой тела при рождении 3500 ± 250 г, переведенных на ИВЛ в родильном зале) и 30 условно-здоровых доношенных новорожденных, родившихся в физиологическом отделении родильного дома ФГБУ «РНИИАП», составивших группу контроля (сравнения). В результате рандомизации, которая осуществлялась методом компьютерной программы генератора случайных чисел по номеру истории болезни, сформированы 2 группы. В I группе (n=36), вводили селеназу из расчета 10 мкг/кг/сут – 1 раз/день внутривенно струйно медленно, в течение 10 дней, II группа (n=40) – без применения селеназы. В данной работе проведен сравнительный анализ некоторых показателей ответственных за антиоксидантную систему защиты (АОС), таких как: сывороточная глутатионпероксидаза (GSH-Px-3) и сывороточная медь/цинк – зависимая супероксиддисмутаза (Сu/Zn – SOD). Еще раз подчеркнем, что активность вышеуказанных ферментов определялась в сыворотке крови, т.е. внеклеточно. Так, активность глутатионпероксидазы сыворотки крови определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА) с помощью тест-системы AbFRONTIER (Корея), а активность Сu/Zn – SOD сыворотки крови методом ИФА, тест-системой Bender MedSystems (США). Исследование указанных выше маркеров проводили в следующие сроки: 1) при поступлении в АРО; 2) на 4-5 сутки; 3) на 10 сутки, либо в исходе заболевания.

Многочисленные работы по изучению действия селена на организм в целом и отдельные органы и системы свидетельствуют о том, что этот эссенциальный микроэлемент, входящий в состав фермента глютатионпероксидазы, является составной частью антиоксидантной защитной системы клеток. В связи с чем, при введении в организм новорожденного селеназы, мы ожидаем эффект повышения концентрации селена, либо увеличение активности селензависимых ферментов, которые, в свою очередь, могут снижать, либо сдерживать степень перекисного окисления липидов и повреждения мембран. В процессе нашего исследования мы проанализировали состояние антиоксидантной системы защиты как у новорожденных с CДР находящихся на ИВЛ, так и в группе условно - здоровых детей и получили следующие результаты представленные в таблице 1.

Таблица 1

Маркеры АОС в группе условно- здоровых новорожденных

и у детей с СДР

Группы	АОС
	GSH-Px сыворотки крови ( нг/мл)	Cu|Zn-SOD сыворотки крови (нг/мл)
Условно-Здоровые (n=30) Ме	2,41	524
Кv_75% Kv_25%	4,4 2,02	855 322
Дети с СДР (n=76) Ме	2,39	400
Кv_75% Kv_25%	3,5 1,3	654 253

Из данных таблицы 1 следует, что у новорожденных, отмечается относительная недостаточность антиоксидантных ферментов, в частности глютатионпероксидазы сыворотки крови (в группе условно-здоровых новорожденных уровень GSH-Px-3 составил 2,41 нг/мл (р < 0,05), у детей с СДР и ПП ЦНС – 2,39 нг/мл (р < 0,05), при норме 3,2 – 3,8 [7]), что в совокупности объясняет, почему у детей процессы липопероксидации преобладают над АОЗ. Далее, нами статистически достоверно доказано, что при введении селеназы (I группа) в дозе 10 мкг/кг/сут, к концу 10 суток происходит значительное повышение в 1,3 раза уровня сывороточной глутатионпероксидазы, который составил 3,13 нг/мл (р < 0,05) (табл. 2).

Выявлено, что уровень Cu/Zn-SOD сыворотки крови, как в группе условно-здоровых, так и в группе детей с СДР, в 3,3 и 2,5 раза, соответственно, превышает верхнюю границу нормы [8]. По нашему мнению, это происходит компенсаторно, и до какого-то момента обеспечивает сдерживанию процессов окислительного стресса. В I группе, при введении селеназы, уровень Cu/Zn-SOD снижается в 1,5 раза быстрее, чем во II, хотя статистической достоверности этого факта получено не было.

Таблица 2

Показатели АОС у детей I и II групп

маркеры	Динамика показателей			Ошибка первого рода
	1 сут	4-5 сут	10 сут	(1-5) сут	(1-10) сут
GSH-Px-3 I гр (нг/мл)	2,39	3,025	3,13	р = 0,032140	р = 0,032131
GSH-Px-3 II гр (нг/мл)	2,39	2,145	2,19	р = 0,016894	р = 0,016885
Cu|Zn-SOD I гр (нг/мл)	400	234,52	257,18	р = 0,242433	р = 0,242428
Cu|Zn-SOD II гр (нг/мл)	400	350	337,38	р = 0,491543	р = 0,491543

Скорее всего, благодаря введению селеназы, в организме новорожденных I группы, происходит не только увеличение концентрации селена в плазме (сыворотке) крови, но и увеличение активности селензависимой глутатионпероксидазы, что в совокупности усиливает антиоксидантную защиту. В свою очередь, активация АОС способствовала достоверному статистически значимому снижению длительности проводимой ИВЛ в 1,6 раз (р < 0,05), а также длительности госпитализации в 1,36 (р < 0,05), у новорожденных I группы (с применением селеназы).

Таким образом, анализ полученных и представленных результатов исследования позволил нам оценить влияние селеназы на активность некоторых ферментов антиоксидантной системы защиты организма в сыворотке крови, а также подтвердить ее эффективность и безопасность использования у новорожденных детей с синдромом дыхательных расстройств и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на искусственной вентиляции легких.

ЛИТЕРАТУРА

1. Дементьева Г.М. Актуальные проблемы пульмонологии новорожденных / Г.М. Дементьева, И.И. Рюмина, М.В. Кушнарева // Рос. вестн. перинатологии и педиатрии. – 2001. - № 5. - С.14-19.

2. Рюмина И.И. Организация медицинской помощи новорожденным с дыхательной недостаточностью / И.И. Рюмина // Пульмонология. – 2002. - №1. – С. 16-19.

3. Володин Н.Н. Неонатология: национальное руководство / под ред. Н.Н. Володина. – М.: ГОЭТАР-Медиа, 2007. – 848.

4. Забродина Л.В. Свободнорадикальное окисление у доношенных новорожденных детей с различной патологией / Л.В. Забродина, Т.В. Савельева // Педиатрия. – 1996. - № 1. – С. 13-16.

5. O'Donovan D. J. Free radicals and diseases in premature infants / D.J. O'Donovan and C.J. Fernandes // Antioxidants and Redox Signaling. – 2004. - Vol. 6, N 1. – P. 169–176.

6. Buonocore G. Oxidative stress in preterm neonates at birth and on the seventh day of life / G. Buonocore, S. Perrone, M. Longini, P. Vezzosi, B. Marzocchi, P. Paffetti et al. // Pediatr Res. - 2002. - Vol. 52. – P. 46-49.

7. Bierl C. Determinants of Human Plasma Glutathione Peroxidase (GPx-3) Expression / С. Bierl, В. Voetsch, Jin Richard C., D.E. Handy and J. Loscalzo // J Biol.Chem. - 2004. - Vol. 279. – Р. 26839 - 26845.

8. Cutler R.G. Critical Reviews of Oxidative Stress and Aging: Advances in Basic Science / R.G. Cutler, H. Rodriguez // MHTML. - 2003. – Р. 1523.