Синёв В.В. ⁽¹⁾, Сазонова М.А.^(1,2,3), Косогорова С.А. ⁽³⁾, Бобрышев Ю.В. ^(2,3), Постнов А.Ю. ⁽¹⁾, Орехов А.Н. ^(2,3), Собенин И.А. ^(1,2,3)

¹Федеральное государственное бюджетное учреждение Российский кардиологический научно-производственный комплекс Министерства здравоохранения Российской Федерации

²Федеральное государственное бюджетное учреждение Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии Российской академии медицинских наук

³Научно-исследовательский институт атеросклероза Инновационный центр Сколково

Вариабельность гетероплазмии некоторых мутаций митохондриального генома человека в клетках мезенхимального и эпидермального происхождения.

Введение:

Одной из актуальных проблем современной медицины является выяснение молекулярно-генетических механизмов возникновения и развития заболеваний. По литературным данным показано, что в патологии человека некоторые мутации митохондриального генома, как врождённые, так и приобретенные и накопленные в течение онтогенеза, ассоциированы с рядом заболеваний.

При изучении ассоциации митохондриальных мутаций с заболеваниями людей, необходима не только качественная (наличие/отсутствие мутации), но и количественная оценка мутантного аллеля митохондриального генома, которой может служить подсчет процента гетероплазмии.

Цель и задачи:

Целью настоящего исследования было установление отличий в уровне гетероплазмии по мутациям G13513A, C3256T, G15059A, G12315A и A1555G митохондриального генома в клетках буккального эпителия и цельной крови человека.

Материалы и методы:

В качестве материала исследования были использованы образцы буккального эпителия и цельной крови 48 доноров.

При выполнении данной научно-исследовательской работы были использованы следующие молекулярно-биологические методы:

· Выделение ДНК методом фенола-хлороформа;

· Метод полимеразной цепной реакции;

· Электрофоретическое разделение фрагментов ДНК на агарозном геле;

· Пиросеквенирование;

· Определение уровня гетероплазмии мутаций митохондриального генома с использованием метода прямой количественной оценки митохондриального генома;

· Методы статистической обработки данных (SPSS).

Основные результаты:

В клетках буккального эпителия и крови выявлены значимые отличия (p≤0,05) между уровнем гетероплазмии мутаций митохондриального генома G13513A и C3256T. В то же время по мутациям G15059A, G12315A и A1555G такие отличия отсутствуют.

Заключение:

Проведенное пилотное исследование показало однородное распределение уровня гетероплазмии мутаций G13513A и C3256T митохондриального генома между клетками буккального эпителия и цельной крови человека. Однако уровень гетероплазмии по мутациям G15059A, G12315A и A1555G не дает однонаправленную характеристику вариабельности гетероплазмии митохондриального генома между данными типами клеток, что может быть обусловлено не достаточной выборкой, её неоднородностью, а также низкой чувствительностью используемого метода детекции однонуклеотидных полиморфизмов митохондриальной ДНК.

Статья может быть полезна специалистам по медицинской генетике и врачам в области ДНК-диагностики митохондриальных цитопатий.

Работа поддержана Министерством образования и науки Российской Федерации.