Медицина/1

Медицина/1. Акушерство и гинекология

Аспирант Кутепова О.Л.

ФГБУ «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания» СО РАМН, г. Благовещенск

Кислородсвязывающие свойства гемоглобина в эритроцитах крови беременных при ЦМВИ

В настоящее время установлено, что цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) играет существенную роль в патологии беременных женщин. Перенесенная на ранних сроках гестации ЦМВИ, чаще приводит к спонтанному прерыванию беременности. При рецидиве заболевания во втором и третьем триместрах наблюдается развитие хронической плацентарной недостаточности, внутриутробной гипоксии и задержке внутриутробного роста плода, преждевременное излитие околоплодных вод и преждевременные роды [1, 3].

В литературе имеются данные о влиянии активной герпесной инфекции на ухудшение реологических свойств крови, процессов оксигенации и трофики тканей матери и плода [2, 6, 8]. Однако мало, что известно о влиянии активной ЦМВИ на кислородсвязывающие свойства гемоглобина эритроцитов крови беременных. Поэтому цель исследования – изучить кислородсвязывающие свойства гемоглобина в эритроцитах крови беременных при ЦМВИ.

Материал и методы исследования

Было обследовано в динамике на сроках 9-12, 18-22 и 30-34 недели 60 серопозитивных к ЦМВ беременных (основная группа) и 60 серонегативных беременных на тех же сроках гестации (контрольная группа). У беременных на сроке 9-12 недель симптоматически ЦМВИ проявлялась в виде ОРВИ – сопровождающейся ринофарингитом. Клинический диагноз – обострение ЦМВИ – устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM или четырехкратного и более нарастание титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности более 65%, а также ДНК цитомегаловируса (ЦМВ) в букальном эпителии или содержимом цервикального канала. Повторное обследование этих же беременных проводилось на сроке 18-22 недель в стадии персистенции заболевания, которая сопровождалась продуктивной репликацией ЦМВ с сохранением высокого титра антител IgG к ЦМВ 1:1600. на сроке 30-34 недели – при латентном течении ЦМВИ (отсутствие маркеров репликации ЦМВ, титр антител IgG к ЦМВ до 1:800).

Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществлялись методами ИФА с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск); выявление ДНК ЦМВ методами ПЦР с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва). Содержание 2,3-ДФГ и АТФ в эритроцитах определяли по методу Луганова И.С. и Блинова М.Н. [5], оксигемоглобина по прописи Эвелина и Мэллой [7], метгемоглобина по Кушавскому М.С. [4].

Работа выполнена в соответствии с принципами Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации (2008 г.) и была одобрена комитетом по биомедицинской этике при ФГБУ «ДНЦ ФПД» СО РАМН в соответствие с принципами конвенции о биомедицине и правах человека.

Все расчеты производили с использованием программного пакета Statistica 6.0. Проверку нормальности распределения проводили по критерию Колмагорова-Смирнова. Проверку гипотезы о статистической значимости различий двух выборок проводили с помощью t-критерия Стьюдента. Показатели считали значимыми при р<0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Анализ полученных результатов исследования показал, что у беременных основной группы наблюдались изменения кислородсвязывающих свойств гемоглобина, которые проявлялись в уменьшении концентрации оксигемоглобина в эритроцитах периферической крови на протяжении всего срока гестации с максимальным проявлением при рецидиве ЦМВИ на сроке 9-12 недель (титр антител IgG к ЦМВ 1:1600) и при продуктивной репликации ЦМВ с сохранением высокого титра антител IgG к ЦМВ 1:1600 на сроке 18-22 недели, по сравнению с показателями контрольной группы (табл. ).

Таблица

Содержание оксигемоглобина, метгемоглобина, 2,3-ДФГ и АТФ в эритроцитах крови беременных с ЦМВИ (M±m)

Срок беременности, нед.	Титр антител IgG к ЦМВ	Основная группа	Контрольная группа
Оксигемоглобин, %
9-12	1:1600	89,97±0,46*	94,65±0,53
18-22	1:1600	91,28±0,43*	96,00±0,65
30-34	1:800	93,35±0,35*	95,65±0,38
Метгемоглобин, %
9-12	1:1600	1,50±0,04*	0,60±0,015
18-22	1:1600	1,02±0,03*	0,77±0,02
30-34	1:800	0,95±0,03*	0,80±0,04
Общий 2,3-ДФГ, мкмоль/мл
9-12	1:1600	7,10±0,06*	4,90±0,06
18-22	1:1600	6,50±0,07*	5,12±0,04
30-34	1:800	5,78±0,8*	5,34±0,05
Общий АТФ, мкмоль/мл
9-12	1:1600	0,64±0,02*	1,13±0,05
18-22	1:1600	0,75±0,05*	1,01±0,03
30-34	1:800	0,79±0,03*	0,85±0,02

Примечание: * - достоверность различий по отношению к контролю при р<0,05.

Нарушение кислородсвязывающих свойств гемоглобина можно объяснить увеличением концентрации внутриэритроцитарного 2,3-ДФГ, эффект которого на облегченное высвобождение кислорода реализуется только при субэквивалентных количествах, то есть, когда его количество меньше, чем гемоглобина. Более того, 2,3-ДФГ имеет большее сродство к дезоксигемоглобину, чем кислород, что позволяет предполагать его конкурирование за соответствующие участки на молекулах гемоглобина при изменении условий внутренней среды эритроидной клетки. Следовательно, наблюдаемый прогрессивный рост показателей 2,3-ДФГ на протяжении всего периода беременности с максимальным проявлением на сроке 9-12 недель при рецидиве ЦМВИ (титр антител IgG к ЦМВ 1:1600), лимитировал возможность полноценного присоединения кислорода к гемоглобину, что способствовало лишь частичной его оксигенации.

Одновременно в эритроцитах крови беременных определялось содержание АТФ, которая регулирует форму, объем и деформацию клеток, определяет энергетический потенциал, контролирует структурную организацию протеолитических комплексов мембраны, в том числе, гемоглобина, и их устойчивость. При уменьшении пула АТФ в эритроцитах страдают энергетические процессы и диффузные свойства мембран, с которыми связаны процессы связывания кислорода гемоглобином и его транспорта к тканям. В ходе исследования выявлено снижение показателей общего АТФ на протяжении всего срока гестации, с максимальным проявлением на сроке 9-12 недель при рецидиве ЦМВИ (титр антител IgG к ЦМВ 1:1600) (табл. ).

Нарушение кислородсвязывающих свойств гемоглобина в эритроцитах крови беременных с ЦМВИ могло явиться следствием высокого содержания метгемоглобина, что выявлялось на протяжении всего срока гестации. Более выраженные изменения в содержании метгемоглобина в эритроцитах крови беременных определялись на сроке 9-12 недель при рецидиве ЦМВИ (титр антител IgG к ЦМВ 1:1600) (табл. ).

Заключение: Таким образом, на основании полученных результатов исследования можно заключить, что ЦМВИ является патогенетически значимым фактором, влияющим на течение многих обменных и метаболических процессов в организме беременной, в том числе, связанных с процессами оксигенации и насыщением кислородом. Выявленные сниженные показатели оксигемоглобина, АТФ и высокие показатели 2,3-ДФГ и метгемоглобина могли способствовать нарушению кислородсвязывающих свойств гемоглобина эритроцитов периферической крови беременных с ЦМВИ и явится причиной развития гемической гипоксии.

Литература

1. Алямовская Г.А., Кешищан Е.С., Адуева С.М., Меджидов А.А. Выявление прямых маркеров цитомегаловирусов и противовирусных антител у детей раннего возраста // Вопросы вирусологии. – 2005. – № 1. – С. 14-19.

2. Андриевская И.А. Дыхательная функция крови у беременных с герпес-вирусной инфекцией // Бюллетень СО РАМН. – 2008. - №. 3 (131). – С. 53-62.

3. Цитомегаловирусная инфекция. Учебное пособие для врачей / И.П. Баранова, О.А. Коннова, Ж.Н. Керимова и др. Пенза, 2008. – 82с.;

4. Кушаковский М.С. Клинические формы повреждения гемоглобина // Лен. отделение. – «Медицина». – 1968. – 324 с.

5. Луганова И.С., Блинова М.Н. Определение 2·3-ДФГ неэнзимотическим методом и содержания 2·3-дифосфоглицерата и АТФ в эритроцитах больных хроническим лимфолейкозом //Лабораторное дело. – 1975. – № 11. – С. 625-654.

6. Луценко М.Т., Андриевская И.А. Структурно-функциональное состояние гемоглобина у рожениц при герпесной инфекции во время беременности // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. – 2011. – Вып. 39. – С. 17-19.

7. Покровский А.А. Биохимические методы исследования (метод определения оксигемоглобина по Эвелин и Мэллой). – М. «Медицина», 1969. – С. 337.

8. Салов И.А., Паршин А.В., Глухова Т. Н. Гемостатический потенциал крови пациенток с угрозой прерывания беременности герпетической этиологии // Фундаментальные исследования. – 2011. – № 9. – С. 124-125.

Кутепова Ольга Леонидовна – аспирант, ФГБУ «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания» СО РАМН, 675000 г. Благовещенск, ул. Калинина, 22, тел.: раб. (84162)772816; моб. 89145762804,

e-mail: helga1509_84@mail.ru.