Медицина

Назаренко Р.В.

Луганский государственный медицинский университет

Изучение влияния кортексина на показатели перекисного окисления липидов Т-лимфоцитов крови in vitro

Гнойно-воспалительные осложнения в хирургической патологии обусловлены сдвигами основных защитных систем организма: иммунитета, гемостаза, неспецифической резистентности организма. Имеющиеся в научной литературе сведения об иммуносупрессивном воздействии структурных компонентов бактерий на отдельные популяции иммунокомпетентных клеток демонстрируют негативную роль пептидогликана (ПГН), липополисахарида (ЛПС) и тейхоевых кислот (ТК) разных видов бактерий в формировании иммунодефицитного состояния.

Кортексин представляет собой комплекс L-аминокислот и полипептидов, который, регулирует процессы перекисного окисления в тканях и органах, а также препятствует образованию избыточного количества свободных радикалов.

Цель работы изучение влияния кортексина на показатели перекисного окисления липидов Т-лимфоцитов крови человека in vitro.

Материал и методы исследования. С целью изучения влияния кортексина на метаболический статус Т-лимфоцитов периферической крови человека, указанные клетки подвергались предварительной инкубации с раствором кортексина в течение 1 ч. Затем в культуры Т-лимфоцитов вносились тестируемые эндотоксины бактерий в действующих концентрациях 100 мкг/мл и инкубировались в течение 6 ч.

Результаты исследования и их обсуждение. Предварительная инкубация CD4+-лимфоцитов периферической крови человека с раствором кортексина существенно уменьшала отрицательное влияние ТК, ПГН и ЛПС бактерий на состояние ПОЛ. Положительное действие кортексина выражалось в снижении активности ПОЛ.

Наиболее выраженный положительный эффект от применения кортексина регистрировался в культурах CD4+-лимфоцитов, в последующем контактировавших с ТК.

Более детальный анализ результатов исследования позволил отметить следующее. Воздействие ТК на CD4+-лимфоциты, предварительно инкубированные с кортексином сопровождалось менее выраженной активацией ПОЛ, в связи с чем внутриклеточное содержание ДК в указанных клетках в конце опыта составило в среднем 0,245±0,012 мкмоль/л. Это было в 1,21 раза ниже, по сравнению с уровнем ДК в культурах CD4+-лимфоцитов влиянию кортексина не подвергавшихся (р<0,05). Кроме того, зарегистрированный показатель достоверной разницы с показателем референтной нормы не имел.

Позитивное влияние кортексина наблюдалось и в экспериментах с бактериальным ПГН, что проявлялось в снижении внутриклеточных концентраций диеновых конъюгат (ДК), малонового диальдегида (МДА) и гидроперекиси липидов (ГПЛ), но без полной их нормализации. Так, после воздействия ПГН на культуры CD4+-лимфоцитов, инкубированные с кортексином, уровень ДК оказался в 1,2 раза, а уровни МДА и ГПЛ в 1,22 раза ниже таковых в культурах интактных CD4+-лимфоцитов (р<0,05 во всех приведенных сопоставлениях). Вместе с тем абсолютные показатели изучаемых метаболитов ПОЛ оставались достоверно выше аналогичных показателей референтной нормы. То есть, не смотря на позитивное влияние кортексина, полного устранения прооксидантного влияния бактериального ПГН не происходило.

Подобная ситуация наблюдалась и с бактериальным ЛПС. Так, внутриклеточный уровень ДК в CD4+-лимфоцитах, инкубированных с кортексином, составляя в среднем 0,412±0,021 мкмоль/л, оказался ниже такового у интактных CD4+-лимфоцитов в 1,19 раза, а уровни МДА и ГПЛ – ниже в 1,19 и в 1,20 раза, соответственно. Во всех приведенных сопоставлениях различия статистически достоверны. Вместе с тем, все уровни указанных метаболитов ПОЛ существенно превышали аналогичные уровни, принятые в качестве референтной нормы.

Вследствие позитивных сдвигов показателей ПОЛ, под влиянием кортексина, коэффициент К для CD4+-лимфоцитах составил 0,255±0,013 у.е., что было в 1,39 ниже подобного коэффициента в культурах интактных CD4+-лимфоцитов (р<0,001). Наряду с этим, зарегистрированный коэффициент К остался повышенным, относительно референтной нормы, в 2,13 раза (р<0,001).

Таким образом, инкубация CD4+-лимфоцитов с кортексином препятствует избыточной активации ПОЛ в субпопуляции CD4+-лимфоцитов крови человека in vitro.

Сходный позитивный эффект от использования кортексина был отмечен и в опытах с ПГН S. haemolyticus. Как оказалось, внутриклеточное содержание ДК в культурах CD8+-лимфоцитах, предварительно инкубированных с кортексином, а в последующем подвергшихся воздействию ПГН, была ниже такового в культурах интактных CD8+-лимфоцитов в 1,21 раза (р<0,01). Для МДА и ГПЛ подобные степени снижения составили 1,19 и 1,20 раза, соответственно (во всех сопоставлениях различия статистически значимы). Однако, не смотря на позитивную динамику изменений показателей ПОЛ, все они оставались достоверно выше аналогичных показателей референтной нормы.

Таким образом, бактериальные эндотоксины (ТК и ПГН S. haemolyticus) в действующей концентрации 100 мкг/мл при непосредственном контакте in vitro с CD4+- и CD8+-лимфоцитами периферической крови человека значительно усиливают в них ПОЛ, что выражается увеличением внутриклеточного содержания ДК, МДА, ГПЛ. Инкубация CD4+- и CD8+-лимфоцитами с кортексином существенно уменьшает прооксидантное действие бактериальных эндотоксинов.