Антилизоцимная активность выделенной микрофлоры у девочек - подростков при неспецифических воспалитель-ных заболеваниях внутренних половых органов

Е.С. Кулакова, Г.И. Чубенко, Т.В. Бабий, В.И.Уфимцева

МУЗ «Детская городская клиническая больница»;

ГОУ ВПО Амурская государственная медицинская академия Росздрава,

г. Благовещенск.

В последнее время исследователи отмечают увеличение процента стертых и первично хронических форм воспалительных заболеваний внутренних женских половых органов. Воспалительные заболевания полового тракта ведут к нарушению овариально-менструального цикла, снижению фертильности, повышению частоты невынашивания беременности, являются этиологическим фактором анти- и интранатального инфицирования плода.

Одним из механизмов длительного переживания (персистенции) возбудителя в организме хозяина является продукция бактериями секретируемых субстанций, инактивирующих факторы иммунитета. Наличие такой способности указывает на возможность почти беспрепятственного участия бактерий в развитии инфекционного процесса.

Высокий адаптивный потенциал микроорганизмов способствует переводу острого инфекционного процесса в хроническую персистирующую форму либо в бактерионосительство.

Целью настоящей работы явилось изучение антилизоцимной активности микрофлоры влагалища и цервикального канала у девочек- подростков при воспалительных процессах внутренних половых органов и при гормональном нарушении становления репродуктивной системы. Согласно Международной классификации болезней X пересмотра (1995) года, девочки-подростки были разделены на следующие подгруппы:

I - с неспецифическими воспалительными заболеваниями (НВЗ) – 95 (53,3 ± 3,7%) человек. В ее состав вошли девочки с неспецифическими цервицитами (НЦ) – 35 (36,8±3,6%) человек и с неспецифическими вагинитами (НВ) – 60 (63,2±3,6%);

II - с бактериальным вагинозом (БВ) – 24 (13, 5±2, 6%) человек;

III - с нарушением репродуктивной системы (НРС) в сочетании с НВЗ -59 (33,1±3,5%) человек. В ее состав вошли девочки с нарушением менструальной функции (НМФ) – 28 (47,5±3,7%) человек и с гипоталамическим синдромом пубертатного периода (ГСПП) – 31 (52,5±3,7%) человек.

Группа сравнения представлена 26 девочками подростками, на момент обследования не предъявлявшими жалоб и не имевшими в течение года воспалительных заболеваний мочеполовой системы.

Для определения видового состава и биологических свойств микрофлоры производили взятие материала из заднего свода влагалища и цервикального канала. Посев материала проводили по методике Л.В. Кудрявцевой. Микробиологические исследования осуществляли по единому методологическому принципу, предусматривающему выделение и идентификацию всех вероятных возбудителей инфекционных заболеваний полового тракта. Основными питательными средами были: 5% кровяной, 10% шоколадный, MRS, энтерококковый, кровяно-теллуритовый, Columbia CAN агары, агар Мюллер-Хинтона, среды Эндо, Сабуро, Вильсен-Блера, ЖСА, Блаурока, Цейсслера, агар и бульон Шедлера, АГВ, В.Е.А. агар и др.

Способность бактерий специфически инактивировать лизоцим определена как их антилизоцимная активность (АЛА). Антилизоцимную активность (АЛА) - определяли у представителей родов: Staphylococcus, Corynebacterium и у представителей семейства Enterobacteriaceae по методу "отсроченного антагонизма", у представителей родов: Streptococcus, Enterococcus, Gardnerella (G. vaginalis) и грибов рода Candida учитывая их культуральные особенности, фотометрическим методом.

Антилизоцимная активность была изучена у 259 штаммов микро-организмов выделенных из нижних отделов репродуктивного тракта у девочек-подростков. Данной активностью обладали 82,2% ±2,4 % штаммов и в группах исследования количество АЛА штаммов было разным. В группе девочек с неспецифическими вагинитами и цервицитами (НВ+НЦ) АЛА штаммы регистрировались в 31,9±3,2% случаев. У девочек с нарушением становления репродуктивной системы в сочетании с неспецифическими воспалительными заболеваниями (НРС+НВЗ) штаммы с АЛА регистрировались в 1,4 раза чаще, чем у девочек с НВ+НЦ и составляли - 44,6±3,4%. Достоверно меньшее количество штаммов с АЛА было зарегистрировано в группе девочек с бактериальным вагинозом (БВ) по сравнению с НРС+НВЗ и в 1,4 раза меньше, чем при НВ+НЦ.

Рисунок 1 Частота штаммов с АЛА УПМ выделенной у девочек -подростков при разных нозологических формах заболеваний

На рис 1. представлена частота штаммов с АЛА условнопатогенных микроорганизмов (УПМ) выделенных из нижних отделов репродуктивного тракта при разных нозологических формах воспалительных заболеваний.

При НВ+НЦ наибольшее количество штаммов с АЛА было зарегистрировано среди представителей рода Staphylococcus - 23,5±5,1% и в порядке убывания регистрировались следующие представители родов: Enterococcus - 19,1±4,8%; с одинаковой частотой регистрировались микроорганизмы с АЛА среди представителя рода Gardnerella (G. vaginalis) и среди грибов рода Candida по 14,7 ±4,3% случаев. Микроорганизмы с АЛА среди представителей рода Corynebacterium регистрировались с частотой - 13,2% случаев, среди представителей семейства Enterobacteriaceae частота штаммов с АЛА составляла - 10,3% и наименьшее количество штаммов с АЛА регистрировалось среди представителя рода Streptococcus (S.agalactiae) - 4,4% случаев. Частота обнаружения штаммов с АЛА среди выделенных УПМ от девочек-подростков с неспецифическими воспалительными заболеваниями репродуктивного тракта, протекающими на фоне нарушений гормональной обеспеченности организма значительно не отличалась от частоты обнаружения штаммов с АЛА выделенных при неспецифических воспалительных заболеваниях полового тракта. Нами зарегистрирована тенденция к увеличению общего количества штаммов с АЛА, по сравнению с группой девочек с НВ+НЦ.

Среди УПМ выделенных от девочек с БВ достоверно меньше регистрировалось количество штаммов с АЛА (23,5±2,9% случаев) по сравнению с количеством штаммов с АЛА выделенных при НРС+НВЗ и тенденция к снижению по сравнению с НВ+НЦ. Достоверно меньше регистрировалось штаммов с АЛА у представителей таких родов как: Staphylococcus, Corynebacterium, грибов Candida. При БВ достоверно чаще регистрировались штаммы с АЛА среди представителя рода Gardnerella (G. vaginalis), чем в других группах исследования. Тенденция к увеличению количества АЛА штаммов, зарегистрирована у бактерий рода Streptococcus (S.agalactiae). Различий в количестве штаммов с АЛА среди представителей рода Enterococcus и представителей семейства Enterobacteriaceae в сравнении с другими группами исследований не обнаружено.

При анализе выраженности персистентных свойств УПМ отмечено их достоверное увеличение в зависимости от тяжести воспалительного процесса.

Так среди представителей рода Staphylococcus уровень АЛА минимальным был в группе девочек с БВ (2,4±0,22 мкг/мл), а максимальным у девочек с НРС+НВЗ (3,4±0,28мкг/мл). Уровень АЛА у представителей рода Corynebacterium в двух группах исследования НВ+НЦ и НРС+НВЗ регистрировался практически на одном уровне, при БВ регистрировалась, тенденция к снижению уровня АЛА.

Максимальный уровень АЛА регистрировался среди представителей семейства Enterobacteriaceae изолированных от девочек с НРС+НВЗ и составлял группе 5,5±0,3 мкг/мл. Тенденция к снижению уровня АЛА зарегистрирована в группе девочек с БВ и НВ+НЦ.

Среди выделенных представителей рода Enterococcus максимальный уровень АЛА регистрировался также в группе девочек с НРС+НВЗ -0,650±0,13 мкг/мл, в других группах исследования отмечена тенденция к снижению уровня АЛА.

У представителя Streptococcus (S.agalactiae) максимальный уровень АЛА регистрировался у бактерий выделенных при НРС+НВЗ-0,375±0,02, минимальных уровень зафиксирован у бактерий выделенных при НВ+НЦ -0,274±0,02мкг/мл.

У представителя рода Gardnerella (G. vaginalis) при БВ зарегистрирован самый высокий уровень АЛА - 0,251±0,02 мкг/мл, по сравнению с другими группами исследования показатели АЛА имели тенденцию к снижению.

Среди представителей грибов Candida максимальный уровень АЛА зарегистрирован в группе НРС+НВЗ, этот показатель достоверно выше, чем уровень АЛА в двух других группах исследования.

Таким образом, при изучении АЛА у выделенных микроорганизмов из нижних отделов репродуктивного тракта у девочек-подростков можно предположить, что ведущая роль в развитии воспалительного процесса и его хронизации принадлежит представителям семейства Enterobacteriaceae, рода Enterococcus и грибам Candida. Представители рода Gardnerella (G. vaginalis) не играют существенной роли в поддержании воспалительного процесса, а являются лишь свидетелем дисбактериоза полового тракта.