Ильдербаев О.З.
Семипалатинская
государственная медицинская академия, Семей, Казахстан
ОТДАЛЕННЫЙ ЭФФЕКТ γ-РАДИАЦИИ В ДОЗЕ 6 Гр ОТ ВНЕШНЕГО ИСТОЧНИКА 60Сo В СОЧЕТАНИИ С ЦЕМЕНТНОЙ ПЫЛЬЮ НА ИММУННУЮ СИСТЕМУ В
ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Введение. Состояние
иммунной системы организма является одним из главных факторов, определяющих
способность к защите от неблагоприятных факторов среды. Иммунные механизмы
интегрированы со всеми остальными системами человеческого организма, и их
нарушения неизбежно негативно отражаются на его состоянии в целом. При этом
система иммунитета является одной из критических точек приложения ряда
патогенных воздействий [1,2,3]. Воздействие ионизирующего излучения на
биологическую систему приводит к изменениям практически во всех ее структурах.
Одной из наиболее радиочувствительных функций организма и животных является
иммунологическая реактивность. Характерной чертой радиационного воздействия
является длительное сохранение повреждений в отдельных звеньях системы
иммунитета и сопряженных с ним отдаленных последствий и осложнений,
проявляющихся ускорением процессов старения, быстрым прогрессированием
хронических заболеваний внутренних органов, латентно протекающих в период
формирования, а также развитием злокачественных новообразований [4].
Сегодня особый интерес представляет отдаленный эффект
комбинированного воздействия радиационного и нерадиационного факторов окружающей среды. Одним из факторов
окружающей среды нерадиационного характера является промышленная пыль. При
длительном вдыхании пыли силикатов развиваются пневмокониозы (силикатозы) и хронические пылевые бронхиты, клиническая
картина которых имеет некоторые особенности, обусловленные физико-химическими
свойствами соответствующих видов пыли. В производственных условиях возможно
воздействие смешенной пыли, содержащей силикаты и свободный диоксид кремния.
При длительном воздействии вредных факторов в процессе профессиональной
деятельности происходит формирование вторичной иммунологической
недостаточности, которая проявляется как клинической симптоматикой, так и
нарушениями клеточного, гуморального иммунного ответа, факторов неспецифической
защиты [5]. На сегодня актуальными представляются отдаленные последствия
комбинированного воздействия радиации и факторов нерадиационного характера
окружающей среды на иммунную систему. Поэтому целью нашего исследования явилось
изучение комбинированного влияния сублетальной дозы
гамма-излучения от внешнего облучения 60Сo и цементной пыли в
отдаленном периоде на иммунную систему организма.
Материал и
методы исследования. Для реализации поставленной цели были выполнены 3
серии опытов на беспородных белых крысах самцах весом 180±
Полученные данные обрабатывались с использованием
общепринятых методов вариационной статистики с вычислением критериев t-Стьюдента.
Результаты
исследования. Исследование показало, что у контрольных животных лейкоциты
крови регистрировались в пределах 6,49±0,17 (×109/л), а у
запыленных животных отмечено 8,25±0,31 (×109/л) (р<0,05) (таблица). При этом отмечается повышение как
абсолютного, так и процентного количества лимфоцитов с 2,75±0,11 (×109/л)
до 5,17±0,17 (×109/л) (р<0,001) и
с 39,01% до 72,20% (р<0,001) соответственно.
Абсолютное количество лимфоцитов у животных подвергавшихся комбинированному
фактору повысилось до 4,38±0,38 (×109/л) (р<0,01),
а процентное количество - на 46,7% (р<0,001).
Общее количество Т-лимфоцитов во второй группе
увеличено на 18,2% (р<0,05), а относительное
количество их снижено с 31,81±2,41% до
24,55±0,96 (р<0,05). Общее количество Т-лимфоцитов
в III группе увеличено на 26,2% (р<0,05), а со стороны процентного количества отмечено не
достоверное изменение. У запыленных животных абсолютное количество Т-лимфоцитов
с хелперной (CD4) активностью имеет тенденцию к увеличению, процентное –
снижается достоверно на 35,2% (р<0,05), у животных,
подвергавшихся радиационно-пылевому фактору, процентное количество Т-хелперов
снижается на 30,3% (р<0,05).
Исследование показало, что у животных получивших сублетальные дозы облучения и подвергавшихся запылению (III группа) абсолютное и процентное количество
Т-лимфоцитов с супрессорной активностью, достоверно
не отличается от контрольного показателя, имеется тенденция к увеличению. При
сравнении абсолютного количества Т-супрессоров III группы со II группой,
выявлено достоверное снижение на 27,5% (р<0,05).
Когда у II группы
абсолютное и процентное количество достоверно повышается: абсолютное количество
- на 42,9% (р<0,01) и процентное количество - на
18,9% (р<0,05) по сравнению с контрольным
показателем. Данное изменение вызывает снижение иммунорегуляторного
индекса (CD4/CD8), который составил в среднем 0,86±0,08, что
достоверно ниже, чем в контроле 1,72±0,22 (р<0,05),
в III группе индекс составил
1,28±0,13 (р2<0,05), снижение за счет более выраженного
увеличения содержания в крови Т-супрессоров (CD8).
Известно, что лимфокинпродуцирующая
активность Т-лимфоцитов отражает функциональную активность Т-системы
иммунитета. Отмечалась динамика к достоверному росту ИТМЛ в реакции торможения
миграции лимфоцитов с фитогемагглютинином, что
свидетельствует о снижении их функциональной активности после воздействия
радиационно-пылевого фактора. У животных отмечено снижение лимфокинпродуцирующей
способности Т-лимфоцитов, увеличение индекса миграции на ФГА с 0,79±0,04 в
контрольной группе до 0,96±0,04 в третьей группе (р<0,05).
Таким образом, изучение количественных показателей
Т-лимфоцитов у животных после комбинированного воздействия выявило повышение их
числа, обусловленное повышением числа Т-хелперов и Т-супрессоров,
снижение иммунорегуляторного индекса связано с
выраженным увеличением количества Т-супрессоров, а
также выявлено снижение функциональной активности нейтрофилов.
В-лимфоциты являются основным клеточным субстратом
гуморального иммунного ответа, который вырабатывает антитела. Существенных
изменений со стороны относительного количества В-лимфоцитов во II группе не
обнаружено, но отмечена тенденция к повышению с 7,21±1,19% до 8,67±0,61%, а в
III группе имеется тенденция к снижению относительного количества В-лимфоцитов
(р>0,05). При сравнении показателя III группы со
II группой процентное количество снижена на 17,6% (р<0,05).
Исследования в эксперименте показали, что количество антителообразующих
клеток (АТОК) в селезенке у животных второй группы снижалось до 39,01±2,91%,
что почти 1,3 раза ниже показателя контрольных крыс (р<0,05),
у животных третьей группы - до 28,56±1,84% (р<0,001).
При силикатозе индекс супрессии
зафиксировано на уровне 21,42%, при комбинированном воздействии
радиационно-пылевого фактора на уровне 42,61%. Уровень концентрации
циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) крови у экспериментальных животных
второй группы достоверно повышался на 49,8% (р<0,05),
на фоне пылерадиационного фактора в III группе
отмечено снижение на 34,6% (р<0,001).
Таким образом, изучение гуморальных факторов
иммунитета у животных после запыления и комбинированного воздействия радиации и
цементной пыли показало разнонаправленность их изменений. С одной стороны,
происходило снижение содержания АТОК в селезенке, уровня ЦИК в периферической
крови, с другой стороны увеличение индекса супрессии
и количества В-лимфоцитов в периферической крови.
У запыленных животных фагоцитарная активность (ФА)
клеток крови составила 35,75±3,19%, что почти не отличается от контрольных
значений, в III группе - 24,75±2,25%,
снижена на 31,6% (р<0,05). Фагоцитарное число (ФЧ)
у животных II группы составляет
в среднем 3,36±0,21 (р<0,01), у III группы в среднем 2,65±0,27 (р<0,05).
Учет кислородзависимого фагоцитарного киллинга в тесте восстановления НСТ является показателем
фагоцитарной и метаболической активности нейтрофильных
гранулоцитов. НСТ-тест отражает итоговую реакцию
одной из ключевых ферментных систем, ответственных за эффекторный
потенциал фагоцитов. Исследование показало, что показатель НСТ-теста
у экспериментально запыленных животных возрос с 4,87±1,55 до 10,38±1,05
(Р<0,05), что свидетельствует о повышении функциональной активности
нейтрофилов, а на фоне радиационно-пылевого фактора в отдаленном периоде
происходит снижение функциональной активности нейтрофилов на 36,14%.
Таким образом, у экспериментальных крыс подвергавшихся
радиационно-пылевому фактору, в отдаленном периоде были выявлены значительные
изменения, которые характеризовались увеличением абсолютного количества
Т-лимфоцитов, в том числе иммунорегуляторных
Т-хелперов, Т-супрессоров, CD4/CD8 индекса,
функциональной активности Т-лимфоцитов,
снижением уровня ЦИК, количества АТОК, снижением
функционально-метаболической активности нейтрофилов.
Список
литературы:
1.Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Иммунодефициты: диагностика и иммунореабилитация // Лечащий врач. -1999. №2-3. –С.63-69.
2.Манько В.М., Петров Р.В., Хаитов Р.М. Иммуномодуляция:
история, тенденции развития, современное состояние и перспективы //
Иммунология. -2002. -№3. –С.132-136.
3.Pennington D.J., Vermijlen D., Wise E.L. et al. The integration of
conventional and unconventional T cels That
characterizes cell-mediated responses // Adv Immunol.
2005. –Vol.87. –P.27-59.
4.Жетписбаев Б., Мусаинова А., Узбекова С., и др. Влияние реаферона
и сублетального гамма-излучения на гуморальное и
неспецифические фагоцитарные факторы в отдаленном периоде.//Мат.VI съезда физиологов Казахстана с международным
участием, Караганда, 2007, -С.71-73.
6.Литовская А.В. Иммунодиагностика и иммунотерапия в клинике
профессиональных заболеваний. //1 Всероссийский съезд профпатологов.
Тезисы докладов. Тольятти. 2000. С.217.
7.Гадаскина И.Д.
Методы изучения экспериментальных пневмокониозов. В кн.: Воспроизводство
заболеваний у животных для экспериментально-терапевтических исследований. Л.,
1954.
1. Оралбек Зайнулданович
Ильдербаев, к.б.н., доцент, Семипалатинская
медицинская академия, Казахстан,
г.Семей, ул.Абая 103. инд: 071400,
E-mail: oiz5@yandex.ru факс (322-2) 56-97-55
Таблица
Некоторые показатели иммунного статуса у
экспериментальных животных
|
|
Показатели |
Экспериментальная группа |
|||||
|
1 группа |
2 группа |
3 группа |
|||||
|
Абс.число |
% |
Абс.число |
% |
Абс. число |
% |
||
|
1 |
Лейкоциты×10 9 /л |
6,49±0,17 |
- |
8,25±0,31 *** |
- |
5,45±0,36 * ººº |
- |
|
2 |
Лимфоциты ×10 9 /л |
2,75±0,11 |
39,01±3,24 |
5,17±0,17 *** |
72,20±2,84 *** |
4,38±0,38 ** |
73,28±3,82 *** |
|
3 |
В-лимф-ты, ×10 9 /л |
0,32±0,02 |
7,21±1,19 |
0,47±0,04 * |
8,67±0,61 |
0,41±0,04 |
7,14±0,38 º |
|
4 |
Т-лимф-ты
×10 9 /л |
1,44±0,08 |
31,81±2,41 |
1,76±0,09 * |
24,55±0,96 * |
1,95±0,15 * |
33,29±3,67 º |
|
5 |
Т-хелперы ×10 9 /л |
0,69±0,04 |
20,92±1,41 |
0,70±0,04 |
13,56±0,47 * |
0,75±0,08 |
14,57±1,73 * |
|
6 |
Т-суп-ры ×10 9 /л |
0,47±0,02 |
11,24±0,42 |
0,83±0,08 ** |
13,86±0,77 * |
0,60±0,07
º |
13,57±1,50 |
|
7 |
ИРИ (CD4/CD8)
|
1,72±0,22 |
- |
0,86±0,08 * |
- |
1,28±0,13 º |
- |
|
8 |
РТМЛ |
0,79±0,04 |
- |
0,71±0,04 |
- |
0,96±0,04 * |
- |
|
9 |
ЦИК (у.е.) |
1,27±0,02 |
- |
2,53±0,25 *** |
- |
0,83±0,06 *** ººº |
- |
|
10 |
ФА (%) |
- |
36,17±2,52 |
- |
35,75±3,19 |
- |
24,75±2,25 *º |
|
11 |
ФЧ |
1,59±0,24 |
- |
3,36±0,21** |
- |
2,65±0,27
*º |
- |
|
12 |
НСТ % |
- |
4,87±1,55 |
- |
10,38±1,05 * |
- |
3,11±0,35 ººº |
|
13 |
АТОК (%) |
- |
49,02±3,51 |
- |
39,01±2,91 * |
- |
28,56±1,84 *** |
|
14 |
ИС (%) |
- |
- |
- |
21,42±1,05 |
- |
42,61±1,21 |
Примечание: Различия с 1-ой
группы достоверны *-р<0,05, **-р<0,01, ***-р<0,001,
различия со 2-ой группой достоверны º-р<0,05,
º-р<0,01, ººº-р<0,001