Ветеринария / 1.Ветеринарная медицина

Д.б.н. Азарнова Т.О., к.в.н. Антипов А.А., Индюхова Е. Н., Ярцева И.С.,

д.х.н., д.б.н. Зайцев С.Ю.

ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина», Россия

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПЕЧЕНИ ЦЫПЛЯТ СУТОЧНОГО ВОЗРАСТА «ШЕЙВЕР 2000» ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ТЕМПЕРАТУРНЫХ РЕЖИМАХ ИНКУБАЦИИ

Инкубация яиц является важнейшим технологическим процессом на птицеводческих предприятиях. Эффективность инкубации (вывод цыплят и качество молодняка суточного возраста) во многом зависит от выбранного в хозяйстве режима инкубации. Основной задачей инкубации является обеспечение в инкубаторе условий, при которых внутри яйца могли бы качественно и полноценно проходить все процессы роста и развития зародыша птицы [9]. При изменении температурного режима в диапазонах выше или ниже нормативных незамедлительно проявляются негативные последствия, выражающиеся в деструкции клеточных, тканных, органных структур, нередко приводящих к выраженным уродствам. Таким образом, изучение влияния температурного фактора на рост и развитие эмбрионов является актуальной проблемой современного птицеводства.

Доказано, что колебания температур в первую фазу развития эмбриона может сильно повлиять на рост зародыша, в лучшем случае провоцируя ускорение либо замедление процесса, в худшем – нарушая симметричное формирование костей скелета и долей легких. Существуют данные о том, что даже в рамках допустимого диапазона температуры от 37 до 38^оС ее колебание приводит к значимым сдвигам темпов роста и развития зародыша [10]

Известно, что печень наиболее подвержена морфофункциональным нарушениям при колебании температур во время инкубации. Данный орган занимает важное место в регуляции обмена веществ, что делает ее причастной к функциям почти всех органов и систем [2].

Известно, что цыплята в процессе своего эмбрионального развития испытывают ряд критических периодов, действие которых при сопутствующем влиянии стрессоров преумножается, способствуя деструктивным изменениям внутренних органов, особенно печени. Доказано, у 19-суточных эмбрионов метаболические процессы в печени особенно уязвимы факторам стресса, что обуславливает в тканях данного органа нарушения, прежде всего, углеводного обмена, а также взаимосвязей его с другими, что значимо снижает адаптационные возможности организма особей [5].

Выше указанное, определено тем фактом, что в печени активируются свободно-радикальные процессы и соответственно, наблюдается интенсификация реакций перекисного окисления липидов [1, 2].

В связи с этим, правильное понимание и прогнозирование многих механизмов морфофункционального изменения внутренних органов цыплят, особенно печени молодняка кур, в том числе развивающихся при различных температурах во время инкубации является актуальным аспектом современной науки и производства.

Цель работы: оценить влияние различных температур (38,0; 38,5 и 39,0^оС) инкубации на гистологическое строение печени цыплят суточного возраста кросса «Шейвер 2000».

Материалы и методы. Инкубационные яйца кросса «Шейвер 2000» приобретали на ФГУП ППЗ «Птичное» от одного родительского стада при соблюдении равенства массы, сроков снесения и времени хранения. Яйца кур яичного кросса инкубировали в 3-х автоматических инкубаторах R-com Maru-100 по 100 штук в каждом. Режимы инкубации: относительная влажность во всех инкубаторах составила 55%; температура 1-ого - 38,0±0,1 ^оС; 2-го - 38,5±0,1 ^оС и 3-го - 39,0±0,1^оС. В процессе инкубации постоянно осуществляли контроль за температурой и относительной влажностью воздуха.

Убой цыплят проходил спустя сутки после вывода. Гистологические срезы готовили согласно общепринятым методикам.

Результаты исследований. Описание гистологического строения печени цыплят суточного возраста (Рис. 1-3). Строма органов представлена тонкими прослойками междольковой и портальной соединительной ткани с проходящими в них сосудами и нервными волокнами. Дольчатость печени слабо выражена. Балочное строение сохранено, печёночные балки короткие, располагаются близко друг к другу. Гепатоциты округлой формы, имеют неравномерно окрашенную цитоплазму со слабовыраженной зернистостью. В большинстве клеток содержатся округлые оптические пустоты различного размера с ровными краями – капли жира. При этом у печени цыплят, входящих в группу №2 капли преимущественно крупного размера (средней площадью 20,26 мкм²), у животных группы №3 капли крупного и среднего размера (средней площадью 13,45 мкм²), у животных группы №1 капли маленького размера (средней площадью 9,33 мкм²), границы между клетками хорошо выражены.

Ядра гепатоцитов чётко просматриваются, располагаются преимущественно в центре клеток, окрашены слабо базофильно, неравномерно: хроматин в них образует крупноглыбчатые диффузные скопления всей площади ядра. Лимфоидные узелки хорошо развиты, мелкого и среднего размера. Диаметр центральных вен увеличен, просвет их заполнен густо расположенными эритроцитами и однородной белковой массой, окрашенной слабо базофильно. Диаметр портальных вен не увеличен, просвет их обычно пуст, а эндотелий имеет плоскую форму. Синусные капилляры слабо просматриваются, кровенаполнение их умеренное, как в центральных участках, так и на периферии долек.

Рис. 1. Морфология печени цыпленка суточного возраста. Группа №1. (гематоксилин и эозин, ок. х7, об. х40).

Рис. 2. Морфология печени цыпленка суточного возраста. Группа №2. (гематоксилин и эозин, ок. х7, об. х40).

Рис. 3. Морфология печени цыпленка суточного возраста. Группа №3. (гематоксилин и эозин, ок. х7, об. х40).

Общее морфофункциональное состояние органов, представленных на рисунках 1,2,3, отражает хорошо выраженную жировую и слабо развитую зернистую дистрофии гепатоцитов без выраженного нарушения гемодинамики. При этом наиболее ярко выражена жировая дистрофия в печени животных группы №2 и наименее - в группе №1.

В гистологической структуре печени цыплят отмечено развитие паренхиматозной жировой дистрофии, что характерно для цыплят в данный период развития, так как питание в первые дни жизни осуществляется за счет желтка [12]. Мелко- и среднекапельная жировая дистрофия печени, по данным Отрыганьева Г.К. (1982) [9], считается допустимым морфологическим изменением.

Данные структурные изменения гепатоцитов не нарушают их функциональную активность, в отличие от крупнокапельного перерождения печени.

Пределы температуры воздуха около яиц, в которых происходит развитие, 37-39^оС. Результаты инкубации, крайне низкие на границах указанного интервала. Так, крупнокапельная жировая дистрофия зафиксирована у цыплят, полученных при температуре инкубации 38,5 и 39,0 ^оС, что подтверждает многочисленные данные о негативном влиянии высоких температур на становление организма эмбрионов кур [7, 8].

Возможно, появление морфологических изменений (жировой и зернистой дистрофий) печени во многом зависит от температуры инкубации. Известно, что ее повышение до 39,5 - 40^оС на протяжении всего периода инкубации вызывает избыточную активизацию свободно-радикальных реакций и, как следствие, процессов липопероксидации, определяющих нарушения обмена веществ у цыплят в эмбриональный период [4,7]. Из предшествующего предложения, а также из литературных данных становится, очевидным факт, значимых нарушений при воздействии стрессоров липидного обмена. Указанное обуславливает не только деструкцию билипидных комплексов клетки, нарушения процессов их обновления, но и дестабилизацию процессов синтеза и распада нейтральных липидов, в том числе в следствии инактивации продуктами ПОЛ ферментов, участвующих в этих процессах [11]. Изложенное позволяет сделать предположение, что крупнокапельная жировая дистрофия является следствием нарушения процессов, обуславливающих использование липидов организмом цыпленка, что позволяет прогнозировать нарушения качества и интенсивности его дальнейшего развития, а значит и будущей продуктивности.

Это же предположение подтверждается, тем фактом, что печень участвует во всех обменах веществ, физиологическая полноценность данных функций осуществляется за счет активной работы – гепатоцитов. Необходимо отметить, что печень выполняет более 50 различных функций, и дестабилизация одной из них приводит к нарушению внутренней среды организма. Избыточное накопление в цитоплазме печеночных клеток включений, которые определяют жировую и зернистую дистрофию, снижает функциональную активность данных тканевых структур.

Печень постоянно сталкивается с различными токсинами, утилизация и инактивация которых особенно актуальна при действии стрессоров и напрямую зависит от функциональной активности гепатоцитов.

Замещение печеночных клеток крупными включения жира, исключают возможность не только полноценно осуществлять свои функции, но и накапливать необходимое количество биологически активных веществ, в том числе витамина А. Данный факт в последующем негативно отразиться на антиоксидантном статусе цыплят, что не позволит их организму своевременно и реактивно препятствовать чрезмерной активации свободно-радикальных процессов и интенсификации липопероксидации в условиях воздействия негативных факторов.

Выводы. Печень является индикатором состояния всего организма, отражающим интенсивность уровня обмена веществ, который способен меняться под влиянием различных факторов [1, 2]. Так, состояние липидного обмена и целостность фосфолипидных комплексов в значительной степени детерминировано интенсивностью свободно – радикальных процессов и, как следствие, процессов перекисного окисления липидов. Нарушения, возникающие под действием различных температур инкубации, определены активизаций свободно-радикального окисления и дестабилизацией метаболизма [1]. Указанное определяет стеатоз печени, обусловленный избыточным образованием продуктов перекисного окисления липидов и ингибированием ферментов различных жизненно важных процессов, в том числе энергетических, в частности, таких как - β-окисление липидов [6].

Заключение. Зафиксированы структурные изменения печени цыплят суточного возраста кросса «Шейвер 2000». Установлена крупнокапельная жировая дистрофия у цыплят, выведенных из яиц, инкубируемых при 38,5 и 39,0 ^оС. Определена тенденция к жировому перерождению печени цыплят при увеличении температуры на протяжении всего периода инкубации.

Благодарность. Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (проект №14-16-00046).

Литература

1. Азарнова, Т.О. Влияние коламина, янтарной кислоты и серина на свободно-радикальные процессы и состояние печени у цыплят кросса «Шейвер 2000» / Т.О. Азарнова, И.С. Ярцева, С.Ю. Зайцев, М.С. Найденский // Птица и птицепродукты. – 2012. – №5. – С. 38-40.

2. Азарнова, Т.О. Гепатопротекторное действие раствора коламина, янтарной кислоты и серина при обработке инкубационных яиц после их дезинфекции формальдегидом / Т.О. Азарнова, И.С. Ярцева, С.Ю. Зайцев, Е.Н. Индюхова, А.А. Антипов // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2013. - №3. - С. 104-110.

3. Азарнова, Т.О. Изучение комплекса этологических, экстерьерных, интерьерных и биохимических показателей качества цыплят суточного возраста при йодированном питании in ovo / Т.О. Азарнова, В.И. Максимов, Е.Н. Индюхова, И.С. Ярцева, С. Ю. Зайцев, М.С. Найденский // Ветеринария Кубани. – 2014. - №4. – С. 16-19.

4. Азарнова, Т.О. Способы диагностики теплового стресса у цыплят / Т.О. Азарнова, М.С. Найденский, С.Ю. Зайцев // Птицеводство. - 2011.- №8. - С. 6-8.

5. Голубцова, В.А. Морфофункциональные изменения органов кроветворения эмбрионов кур при разных режимах инкубации: автореферат дис. … канд. биол. наук. – М., 2008. – 18 с.

6. Журавлева, Л.В. Печень и возраст: взгляд на проблему врача-терапевта / Л.В. Журавлева, О.В. Лахно, О.И. Цивенко // Пробл. старения и долголетия. – 2012. - №3. – С. 316 – 327.

7. Индюхова, Е.Н. Оптимизация тиреоидного статуса у цыплят суточного возраста кросса «Шейвер 2000» / Е.Н. Индюхова // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2014. – №. 4. - С. 165-169.

8. Орлов, М.В. Биологический контроль в инкубации / М.В. Орлов. – М.: Россельхозиздат, 1987. – 223 с.

9. Отрыганьев, Г.К. Технология инкубации / Г.К. Отрыганьев, А.Ф. Отрыганьева. ― М.: Россельхозиздат, 1982. ― 142 с.

10. Merat, P. Effects de temperatures d'incubation legerement superieures ou inferieures a la normal sur la mortalite embryonnaire, les performances et l'etat du plumage apres l'eclosion / P. Merat, G. Conquerelle // Zootechn. - 1991. - №2. - P.67-72.

11. Noble, R.C. Observations on fatty acid uptake and utilization by the avian embryo / R.C. Noble, B.K. Speake // Prenat. Neonat. Med. – 1997. – Vol. 2. – P. 92-100.

12. Tarugi, S. Apolipoprotein B-100 production and cholesterol ether content in the liver of the developing chick / S. Tarugi, L. Nicolini, S. Marchi, P. Bertolini // Journal of Lipid Research. – 1994. – Vol. 35. – P. 2019-2031.