Показатели апоптоза, как критерии адекватности выбранной терапии при лечении склеродермии

Г.В. Николашин, Л.П. Колбасина, П.Н. Колбасин, А.А. Писарев

Крымский Государственный Медицинский Университет

им. С.И. Георгиевского, г. Симферополь

Склеродермия относится к распространенным хроническим заболеваниям
соединительной ткани из группы системных болезней соединительной ткани.
Тенденция к увеличению заболеваемости, социальная значимость проблемы,
торпидное рецидивирующее течение определяют актуальность дальнейшего изучения
теоретических и практических аспектов этой патологии.

Взаимодействие многообразных патогенетических факторов в развитии заболевания
осложняет выбор методов лечения и, очевидно, снижает порой их эффективность. При
стабилизации патологического процесса с тенденцией к разрешению индурации и склероза
показаны ферментные препараты, иммуномодуляторы (циклоферон), спазм политики,
биостимуляторы.

Целью данного исследования явилось изучение состояния апоптоза в зависимости от
сроков заболевания склеродермии

Материалы и методы

Главным проявлением апоптоза является деградация хроматина. Ее основой служит
ферментативное расщепление ДНК.

Деградация хроматина при апоптозе является активным процессом, зависящим от
температуры, источников энергии, синтеза РНК и белка de novo. Различные этапы
деградации ДНК катализируются разными формами эндонуклеаз, отличающимися
субстратной специфичностью и условиями проявления активности.

Методы выявления апоптоза довольно разнообразны. Ориентировочная идентификация апоптоза
возможна на основании вьшеназванных морфологических признаков. Более доказательные
подходы в большинстве случаев основаны на выявлении формирующихся разрывов ДНК, ее
деградации и потери клеткой части генетического материала. Чаше всего используют
электрофоретическое разделение полидез оксирибонуклеотидных фрагментов,
экстрагируемых из клеток.

Другие методы основаны на катализируемом терминальной дезоксирибонуклеотидилтрансферазой синтезе олигонуклеотидов из меченых предшественников и их встраивании в ДНК через ее свободные концы, формирующиеся в участках разрывов.

Показатели	Единицы измерения	Больные очаговой склеродермией (п = 120)	Здоровые (п = 20)
	109/ л	О 85+0,04
		Р<0 05	033 +007

СD95		26 70+ 1 11

	%

		Р<0 05	1653+05
Аnnexin V	нг/мл	35,90+ 0,78	4,47+ 0,54
		Р<0 001

Показатели

CD95	10 9л	0,82+ 0,01	0,83 + 0,01	0,88+ 0,01	0,33 + 0,07
CD95	%	25,01 +0,21	25,03 + 0,13	27,65 +0,75	1 6,53 +0-,5
Annexin V	нг/мл	23,5+ 0,45	24,1 + 0,34	36,7+ 0,8	4,47+ 0,54

Длительность
болезни

6-12месяцев
(n=47)

Длительность
болезни

1-5 лет

(n=30)

Длительность
болезни бо-
лее 5 лет

(n=43)

Здоровые

(n=20)

Единицы
изменения

Как следует из анализа полученных данных, у больных очаговой склеродермией имело
место усиление апоптоза (повышение уровня СD95 позитивных лимфоцитов и Рs).

Исследуя корреляционные связи между уровнем показателей клеточного иммунитета и
показателями апоптоза, мы обратили внимание на наличие тесной обратной
корреляционной связи (г > -0,5) между показателями клеточного иммунитета (уменьшение
количества СDЗ+, СD4+) и показателями апоптоза (рост СD95 и Annexin V). Данная
обратная корреляционная связь отражает степень деградации клеточного иммунитета.
Имеет место интенсификация процессов апоптоза за счет гибели клеток СDЗ+ и СD4+.

Результаты и их обсуждение

Благоприятная динамика со стороны патологического процесса начинала проявляться
уже к середине второй недели от начала лечения. Улучшилось общее состояние больных,
уменьшились парестезии, зуд, онемение в очагах поражения, постепенно уменьшались
воспалительные явления в отечно-эриматозной фазе. В стадии индурации кожа становилась
мягче, эластичнее, легче бралась в складку, начали намечаться участки атрофии. К концу
курса лечения у всех больных основной группы констатирована различная степень
клинического улучшения. Наилучшие результаты получены у больных бляшечной формой
склеродермии, особенно при локализованном процессе - клиническая ремиссия у 30,0%
больных в сравнении с 16,7% при распространенном (различия достоверны р<0,01),
значительное улучшение, соответственно в 55,0% и в 16,7% случаев (р<0,05).

В группе больных со склероатрофическим лихеном клиническая ремиссия достигнуты в
9,1% случаев, значительное улучшение - в 36,4%. Эти результаты были значимо ниже, чем у
больных бляшечной локализованной формой склеродермии.

Линейная форма склеродермии оказалась более резистентной к проводимой терапии,
значительное улучшение отмечено лишь в 28,6% случаев по сравнению с 55,0% у больных
локализованной бляшечной склеродермией, (р<0,05).

При поверхностной склеродермии Гунберо и атрофодермии Пасси-ни-Пьерини ввиду
малого количества наблюдений интерпретировать результаты лечения затруднительно.

Анализируя эффективность комплексного лечения в зависимости от активности
склеродермического процесса, мы установили, что клинической ремиссии в стадии,
эритемы удалось достичь к концу курса лечения только у одной больной с единичнымии
очагами (12,5%). У остальных пациентов этой группы дольше сохранялась воспалительная
реакция в виде покраснения и отечности в центре очагов и фиолетового ободка по
периферии. Значительное улучшение зарегистрировано у 4 больных (26,7%), улучшение - у
9 (60,0%), незначительное улучшение у 3 (33,3%), (р<0,05). Более высокие результаты
получены у больных, находившихся в стадии индурации, после затухания активности
процесса. Уплотнение в очагах поражения полностью исчезло (клиническая ремиссия у 7
(29,2%) больных, сохранялись остаточные явления индурации (значительное улучшение) у
11 (15,9%) частичная индурация (незначительное улучшение) оставалась у 2 (8,3%)
больных.

У пациентов, составивших третью группу (стадия атрофии) изменения в
склеродермических очагах были незначительно, сохранялась стойкая атрофия. У этих
больных имелось и некоторое уплотнение кожи, которое в динамике лечения уменьшалось.
Улучшение отмечено у 2 (33,4%), незначительное улучшение у 4 (66,0%) больных.

Таким образом, результаты терапии находились в четкой зависимости от активности
склеродермического процесса. Лечение, проводимое в период индурации, оказалось более
эффективным, чем в острой и подострой стадии при наличии воспалительной активности и
преобладании кожной эритемы, атрофия же изменялась мало.

Таким образом, предложенная комплексная терапия приводит к быстрому выраженному
улучшению и позволяет достичь стойкой ремиссии.