Медицина/ Морфология

К.м.н. Афанасьева О.Г.

Медицинский институт Северо-Восточного федерального университета

им. М.К. Аммосова, Республика Саха/Якутия, Россия

Исследование морфологии лимфатических узлов при экспериментальном опухолевом росте.

Современные знания в области взаимоотношений опухоли и организма свидетельствуют о том, что ведущее значение в реакции организма на злокачественный рост имеет иммунный ответ макроорганизма. Особая роль в формировании и реализации иммунного ответа принадлежит лимфатическим узлам. Большинство злокачественных опухолей на различных этапах своего развития метастазируют по лимфатической системе (1,2,3).

При развитии опухолевого процесса основную антигенную нагрузку воспринимают лимфатические узлы, регионарные к месту возникновения первичной злокачественной опухоли (4). Поэтому важнейшим критерием иммунной защиты является оценка состояния регионарного лимфатического аппарата.

Целью настоящего исследования явилось изучение структуры и цитоархитектоники пахового и подвздошного лимфатических узлов белых беспородных мышей при экспериментальном опухолевом росте.

Материал и методы исследования: В качестве экспериментальной модели был взят асцитный штамм опухоли Эрлиха, растущий под кожей. Для создания модели экспериментальной опухоли 0,1 мл асцитной жидкости, содержащей 3,0*10⁵ опухолевых клеток, вводили подкожно в бедро экспериментальных животных. Животных разделили на 2 группы: 1-интактные животные (20), 2-животные с экспериментальной опухолью (20). В качестве объекта исследования были взяты паховый и подвздошный лимфатические узлы. Исследование лимфатических узлов проводили на стандартизированных срезах, окрашенных гематоксилин-эозином, азур-2-эозином. Используя принципы морфометрии, определяли относительную площадь всего среза, площади коркового и мозгового вещества и площадь капсулы, трабекул, краевого синуса, первичных и вторичных лимфоидных узелков, коркового плато и паракортикальной зоны, мозговых тяжей и мозговых синусов. В структурно-функциональных зонах лимфатических узлов дифференцировали следующие клеточные элементы: лимфобласты, средние и малые лимфоциты, макрофаги, ретикулярные клетки, плазмобласты, плазматические клетки разной степени зрелости. Результаты обрабатывались методами вариационной статистики.

Результаты собственных исследований и их обсуждение: Исходя из того, что паховые и подвздошные лимфатические узлы в условиях нормальной гемо-лимфоциркуляции имеют некоторые различия в микроанатомической организации, то и структурные преобразования под воздействием опухолевого роста будут несколько различны. Полученные нами результаты исследований о морфофункциональных преобразованиях в лимфатических узлах различной локализации расходятся с данными И.В. Мастихина, В.С. Тесленко, В.Н. Горчакова, В.П. Николина, Н.Г. Колосовой (1999), свидетельствующими о стереотипном характере реакции лимфатических узлов на опухолевый рост вне зависимости от их локализации по отношению к опухоли. Спустя 5 суток после подкожной прививки опухолевых клеток асцитного штамма опухоли Эрлиха, наиболее выраженные изменения произошли в паховом лимфатическом узле, который в данном случае является регионарным к моделируемой опухоли. В начале опухолевого роста, когда основной неопластический процесс ограничен, в регионарных лимфатических узлах возникают сдвиги, свидетельствующие о напряжении защитных функций (5). Общая площадь пахового лимфатического узла, спустя 5 суток после подкожной прививки опухолевых клеток, увеличивается на 3,3%. В корковом веществе пахового лимфатического узла нами выявлено практически полное отсутствие первичных лимфоидных узелков (1,24±0,21) по сравнению с группой интактных животных (20,10±1,32). Вторичные лимфоидные узелки значительно гипертрофированы (22,48±1,20) за счет достоверного увеличения размеров герминативных центров (рис.1), в которых увеличивается содержание лимфобластов 1,10±0,07 (у интактных животных 0,50±0,02), средних лимфоцитов 31,50±0,45 (у интактных животных 9,09±0,33), макрофагов 1,70±0,02, что согласуется с данными Э.А. Бадриевой (1979), Е.Е. Самотыя, Л.А. Анисимовой (1984), Д.Э. Цыплакова (1988).

Спустя 5 суток после подкожной прививки опухолевых клеток, нами выявлено значительное увеличение площади паракортикальной зоны 36,14±0,51 (у интактных животных 17,86±0,13), посткапиллярные венулы расширены, заполнены клетками крови. Наши данные не подтверждают результаты исследований Н.В. Бородая (1980) о том, что паракортикальная зона узкая, нередко представлена прослойками между крупными гиперплазированными фолликулами, посткапиллярные венулы немногочисленны, эндотелий их уплощен. В клеточном составе паракортикальной зоны происходит увеличение относительной численности лимфобластов на 35,2%, малых лимфоцитов на 7,3% и макрофагов на 38,3%, что соответствует данным Р.Т. Маннаповой (1983) и И.С. Каспаровой (1983). По литературным данным, возрастание количества макрофагов происходит при защитных реакциях организма, а фагоцитоз макрофагами лимфоцитов, нейтрофилов и эозинофилов рассматривается как матричный материал для синтеза антител в процессе иммуногенеза (6). Гипертрофия структур коркового вещества и комплекс клеточных изменений свидетельствуют об активации лимфопоэза в паховом лимфатическом узле. В структуре мозгового вещества уменьшается площадь мозговых синусов (10,12±0,53) по сравнению с группой интактных животных (13,70±0,67). Мозговые тяжи представлены в основном плазматическими клетками разной степени зрелости, макрофагами. Уменьшение относительных размеров мозговых синусов по сравнению с интактными животными указывает на снижение транспортной функции пахового лимфатического узла. В то же время наблюдается расширение краевого синуса 2,56±0,32 (у интактных животных 1,38±0,33), что может свидетельствовать о нарастании давления лимфы в регионарном лимфатическом русле вследствие непрерывного ее образования в зоне опухоли и нарастающего затруднения оттока лимфы через паховый лимфатический узел. Функциональная и морфологическая пластичность лимфатической системы обусловливает быструю перестройку ее корней, мобилизацию коллатералей для обеспечения нормального лимфообращения (7). Таким образом, опухолевый рост приводит к изменению структуры пахового лимфатического узла, что обусловливает затруднение оттока лимфы из зоны опухолевого роста и ее максимальную биологическую обработку.

Изменения в структуре подвздошного лимфатического узла, который является висцерально-соматическим (собирает лимфу не только от сомы, но и от внутренних органов), спустя 5 суток после подкожной прививки суспензии опухолевых клеток менее выражены. Это согласуется с данными Р.Т. Маннаповой (1983) о том, что в отдаленных лимфатических узлах также наблюдались лимфоидно-гиперпластические и макрофагальные процессы, но менее выраженные, чем в паховых лимфатических узлах. Так, в паховом лимфатическом узле при опухолевом росте Т-зависимая зона увеличивается в 2 раза, а В-зависимая зона уменьшается на 19,8%, в подвздошном лимфатическом узле происходит увеличение Т- и В-зависимых зон на 2,3% по сравнению с группой интактных животных. Вместе с тем при анализе цитоархитектоники подвздошного лифатического узла выявлены значительные изменения клеточного состава. В герминативных центрах вторичных лимфоидных узелков наблюдается увеличение количества средних лимфоцитов 29,07±0,84 (в группе интактных животных 5,82±0,18) и уменьшение малых лимфоцитов 54,50±1,05 (у интактных животных 90,70±0,33); в паракортикальной зоне увеличивается число лимфобластов 1,73±0,08 (0,29±0,07), малых лимфоцитов; в мозговых тяжах по сравнению с интактными животными увеличивается количество плазмобластов 4,24±0,42 (2,65±0,06), незрелых плазматических клеток 36,70±0,44 (10,10±0,35). Через 5 суток после подкожной прививки опухолевых клеток в мозговых синусах подвздошного лимфатического узла увеличивается количество средних и малых лимфоцитов (10,50±1,10 и 35,00±1,70 соответственно), макрофагов по сравнению с интактными животными. Иммунная противоопухолевая реакция, как установлено, осуществляется в основном за счет клеточного, а не гуморального звена иммунитета, что соответствует данным Ю.А. Уманского и В.Г. Пинчука (1982). Более выраженные изменения в клеточном составе подвздошного лимфатического узла могут быть обусловлены тем, что часть лимфы, поступающая из региона опухолевого роста, минуя паховый лимфатический узел, непосредственно поступает в подвздошный лимфатический узел, в котором подвергается иммунной, биологической и химической обработке.

Заключение: Различная ответная реакция пахового и подвздошного лимфатических узлов на прогрессию опухолевых клеток зависит не только от степени антигенного воздействия и регионарности данных узлов, но может быть обусловлена изначально различной функциональной специализацией. Так, в паховом лимфатическом узле при моделировании опухолевого роста увеличиваются размеры коркового вещества на 11,7% в основном за счет значительного увеличения размеров вторичных лимфоидных узелков 22,48±1,20 (у интактных животных 5,80±1,03) и паракортикальной зоны 36,14±0,50 (у интактных животных 17,86±0,13) на фоне резкого уменьшения размеров первичных лимфоидных узелков (1,24±0,21) и коркового плато (11,60±0,54). Т-зависимая зона увеличивается в 2 раза, В-зависимая зона уменьшается на 19,8% по сравнению с группой интактных животных. В подвздошном лимфатическом узле на 6-е сутки после подкожной прививки опухолевых клеток размеры коркового и мозгового вещества достоверно не отличаются от соответствующих значений в группе интактных животных. При этом размеры вторичных лимфоидных узелков в подвздошном лимфатическом узле увеличиваются в 6 раз по сравнению с интактными животными (5,53±0,42), тогда как в паховом лимфатическом узле размеры вторичных лимфоидных узелков увеличиваются в 3,9 раза (5,80±1,30 и 22,48±1,20 соответственно). В подвздошном лимфатическом узле увеличиваются Т- и В-зависимые зоны на 2,3% по сравнению с интактными животными.

Выводы:

1. Структурные преобразования в лимфатических узлах при моделировании опухолевого процесса зависят от их топографии по отношению к опухоли.

2. Более выраженные изменения структуры выявлены в паховых лимфатических узлах, которые являются узлами первого порядка по отношению к моделируемой опухоли.

Литература:

1. Грех И.Ф. Рак и лимфатическая система //Вопросы онкологии.1971.Т.17.№10.С.101-110.

2. Аничков Н.М., ЗиновьевА.С. Морфологические маркеры в диагностике опухолей. Новосибирск: Из-во Новосибирского Университета,1993.С.15-17.

3. Каралин Е.И., Вардосанидзе В.К., Непомнящих Л.М. и др. Комплекс молекулярно-генетических характеристик, маркирующих метастатические клетки рака желудка в лимфатических узлах // проблемы клинической и экспериментальной лимфологии. Новосибирск,1996.С.126-127.

4. Потапов Ю.Н. Морфологические изменения опухоли и лимфоидной ткани при моно- и сочетанной химиотерапии иммуномодуляторами и цитостатиками: Автореф. дис.докт.мед.наук. М., 1993.С.10-31.

5. Ульянова Т.Н. Морфологические изменения лимфатических узлов при развитии опухолевого процесса в эксперименте: Автореф. дис. канд. мед. наук. Киев,1971,С.12-16.

6. Эммануэль Н.М. Кинетика экспериментальных опухолевых процессов.- Москва: Наука,1977.-С.414.

7. Бородин Ю.И., Григорьев В.Н., Умбетов Т.Ш. Сравнительное исследование перестройки микроанатомической организации лимфатических узлов, дренирующих зону венозного застоя и локализованных в ней // Бюл.Сиб.отд. РАМН,1990.№2.С.405-408.