Воронова М.Ю., Багаева О.С.

Одесский национальный университет им. И. И. Мечникова

Подбор бактерий – антагонистов плесневых грибов, поражающих субстрат для культивирования вешенки

Вешенка обыкновенная (Pleurotus ostreatus ( Jacq. Fr.) - ценный обьект грибоводства. При промышленном разведении вешенки наблюдаются трудности, связанные с поражаемостью целлюлозосодержащего субстрата, на котором ее культивируют, плесневыми грибами. Борьба с плесневыми грибами при интенсивном разведении вешенки затруднена, так как мицелий развивается в толще субстрата, который находится под полиэтиленовой или пропиленовой пленкой.

Основные методы борьбы с плесенью – профилактика в виде регулярных санитарно-гигиенических мероприятий и превентивная обработка субстрата фунгицидами. Эти мероприятия должны проводиться до посева мицелия в субстрат. В период плодообразования и плодоношения применять ядохимикаты нельзя. Это - важное условие получения ценных плодовых тел грибов и охраны труда. При нарушении сроков внесения пестицидов или при увеличении их доз наблюдается накопление отравляющих веществ в продукции, могут образовываться уродливые плодовые тела. Применение бактерий - антагонистов плесневых грибов вместо пестицидов может явиться экологически безопасным, альтернативным методом борьбы с конкурентной микрофлорой, снижающей урожай вешенки.

В связи с выше изложенным, целью настоящей работы было: выделение плесневых грибов, которые наиболее интенсивно поражают субстрат и поиск бактерий, проявляющих антагонизм к этим микромицетам, но не ингибирующих рост вешенки.

Для получения чистых культур микроорганизмов использовали традиционные методы. Для выделения плесневых грибов – конкурентов вешенки отбирали блоки, пораженные разными (по внешнему виду) фитопатогенами с оценкой поражения в 2 – 3 балла (по шкале Григанского)[1]. Чистые культуры бактерий - потенциальных антагонистов этих микромицетов выделяли из мест в пятнах плесени, в которых была отмечена задержка роста возбудителей болезни вешенки.

Нами было выделено 15 изолятов плесневых грибов – конкурентов вешенки. Из участков в пятнах плесени , в которых было отмечено ингибирование роста микромицетов, было выделено 17 изолятов бактерий – потенциальных антагонистов конкурентов вешенки. Плесневые грибы относились к родам –Trichoderma (10 изолятов), Penicillium (3 изолятов), Aspergillus (2 изолятов).

Для дальнейшего исследования нами были избраны микромицеты рода Trichoderma, так как они доминировали в исследуемых блоках. Кроме того, по многочисленным литературным данным, именно эти конкуренты приводят к значительному снижению урожая вешенки. Использование метода перпендикулярных штрихов позволило выявить 4 изолята бактерий, которые проявили антагонистическую активность по отношению к выделенным плесневым грибам рода Trichoderma(рис.1).

Б

А

Рис.1 Антагонистическая активность выделенных бактерий к микромицету Trichoderma sp.

А –отсутствие антагонизма , Б – антагонизм + +

Эти бактерии были идентифицированы, как представители рода Bacillus .На развитие вешенки эти изоляты бактерий существенного влияния не оказывали.

Для количественной оценки атнагонизма использовали метода отсроченного антагонизма. Для этого бактериальную суспензию каждого из изолятов бактерий высеивали петлей в центр чашки Петри. После 48 часов инкубации к выросшей культуре подсевали штрихом тест – культуру микромицета Trichoderma sp. Результаты учитывали по величине зон задержки роста тест культуры бактериями через 72 часа. Степень антагонистической активности бактерий учитывали по величине зоны фунгистатического или фунгицидного действия (табл. 1).

Таблица 1

Антагонистическая активность исследуемых бактерий к микромицету Trichoderma sp., по методу отсроченного антагонизма

Штаммы бактерий антагонистов	Фунгицидное действие/мм	Фунгистатическое действие/мм
Bacillus А.2	11,05 ± 0,4	21,2 ± 0,6
Bacillus А.2.1	10,03 ± 0,5	20,3 ± 0,5
Bacillus А.3	11 ± 0,6	20,5 ± 0,4
Bacillus А.4.1	–*	4,3 ± 0,5

*– отсутствие антагонизма

Таким образом, установлено, что выделенные изоляты бактерий рода Bacillus (А.2, A.2.1, А.3, А.4.1) проявили фунгистатическое действие по отношению к Trichoderma sp.

Отобранные изоляты бактерий не ингибировали развитие вешенки. Выделенные бациллы являются естественными компонентами микрофлоры целлюлозосодержащих субстратов и, вероятно, вполне безопасны для человека, предположительно имея статус GRAS [2]. Это дает возможность предположить, что биопрепарат на основе отобранного изолята бактерий может быть использован для защиты от поражения плесенью грибных блоков с развитым мицелием вешенки.

Литература:

1. Григанський А. П., Гончаренко Н. А., Кирик М. М. Ураженість субстрату//Агроєкол. Журнал. – 2002. – N 5. – С. 19 – 20.

2. Бациллы. Генетика и биотехнология. Под ред. Харвуда, М. Мир. 1992 – 531с.