Клюев Д.А.
Карагандинская государственная
медицинская академия, Казахстан
Показатели
окислительного метаболизма в крови больных артериальной гипертензией и сахарным
диабетом II типа.
Сахарный диабет (СД) и артериальная гипертензия (АГ) — две взаимосвязанные патологии, обладающие мощным взаимоусиливающим повреждающим действием, направленным сразу против нескольких органов-мишеней: сердца, почек, сосудов сетчатки глаза и магистральных сосудов. /1/
Согласно современным
представлениям о многоступенчатой системе регуляции сосудистого тонуса, в
которой активно задействованы липоксины, цитокины, вазоактивные пептиды,
нейромедиаторы и гормоны, в качестве важнейших регуляторов локального и
системного кровообращения признаны активные метаболиты кислорода (АМК). Последние
являются одними из важных посредников лейкоцитарно-эндотелиального
взаимодействия. Доказано, что помимо лейкоцитов крови АМК продуцируются
клетками сосудистой стенки (эндотелий, адвентиций, гладкомышечные клетки.) и
через внутриклеточные посредники (фосфолипаза А2 и С, протеинкиназы и др.) они
способны изменят тонус гладких мышц сосудов продукцию эндотелием адгезивных
молекул, липоксинов, хемоксинов,
цитокинов /2/.
Таким образом, при
изучении патогенеза и течения АГ несомненный интерес представляет исследование
процессов, запускаемых в присутствии АМК.
Целью данной работы
явилось изучение содержания продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и
окислительной модификации белков (ОМБ) в крови больных артериальной
гипертензией (АГ) и сахарным диабетом II типа (СД2).
Материалы и методы
исследования.
Объектом исследования
служила плазма крови 23 больных. Основную группу составили 13 больных с
артериальной гипертензией в сочетании с СД2 (группа 1), в группу сравнения
вошли 10 человек с СД2 без наличия АГ (группа 2). В качестве контроля использовалась
плазма крови 9 практически здоровых
людей.
Уровень ПОЛ оценивали по
содержанию диеновых коньюгат и малонового альдегида в плазме крови. Диеновые
конъюгаты (ДК), после экстракции смесью гексан – изопропанол (1:1), в плазме
определяли по методу В. Б. Гаврилова и М. И. Мешкорудной /3/ Содержание
малонового диальдегида (МДА) в плазме и моче определяли в реакции с ТБК по
методу Э. Н. Коробейниковой /4/.
В плазме крови определяли
степень ОМБ по методу Levine R.L. в модификации Дубининой Е.Е и
соавт., /4/. Оптическую плотность образовавшихся производных
динитрофенилгидразонов регистрировали при различных длинах волн: 356 нм –
алифатические кетодинитрофенилгидразоны нейтрального характера (КДНФГн); 370 нм
– алифатические альдегиддинитрофенилгидразоны нейтрального характера (АДНФГн);
430 – алифатические кетодинитрофенилгидразоны основного характера (КДНФГо); 530
– алифатические альдегиддинитрофенилгидразоны основного характера (АДНФГо).
Степень ОМБ в плазме выражали в единицах оптической плотности на 1 мл.
Результаты и их
обсуждение.
В плазме крови больных
исследуемых групп отмечалось стойкое повышение интенсивности процессов ПОЛ и
ОМБ по сравнению с группой контроля. Так, в плазме крови больных группы 1
содержание ДК составило 4,409±0,7 мкмоль/мл, что достоверно
превысило контрольные показатели в 1,46 раза. Содержание МДА в плазме крови тех
же больных превышало контрольные показатели в 1,95 раза и составило 6,27±0,81
нмоль/мл. Содержание продуктов ПОЛ в плазме крови больных группы 2 также
отличалось от контроля и показателей плазмы крови больных группы 1. Содержание
ДК и МДА в плазме крови этих больных составило 4,06±0,58
мкмоль/мл и 5,37±0,7 нмоль/мл соответственно. Таким
образом, мы можем сделать вывод о том, что в плазме крови больных с сочетанием
АГ и СД2 содержание продуктов ПОЛ выше, чем у больных СД2. Это может быть как
следствием развития АГ, так и одним из факторов, способствующих ее
прогрессированию. В то же время, мы не можем с достаточной степенью уверенности
говорить о том, что достоверно более низкая концентрация МДА в плазме крови
больных группы 2 по сравнению с плазмой крови больных группы 1, свидетельствует
о меньшей скорости образования этого продукта. Одной из особенностей данной
методики определения МДА в плазме крови является то, что связанная форма МДА
остается спектрофотометрически неактивна в используемом волновом диапазоне. При
этом отличия содержания ДК между группами недостоверны. Исходя из этого, мы не
можем с уверенностью утверждать, что у больных группы 1 интенсивность процессов
ПОЛ в плазме крови выше, чем у больных группы 2. С большей уверенностью об изменении
интенсивности окислительного метаболизма можно говорить после изучения других
его проявлений, например ОМБ.
Результаты исследования
показателей ОМБ в плазме крови всех исследуемых групп представлены в таблице 1.
Таблица 1.
Степень ОМБ плазмы крови
больных исследуемых групп (M+m).
|
Группа |
КДНФГн |
АДНФГн |
КДНФГо |
АДНФГо |
|
Контроль |
3,41±0,09 |
3,40±0,09 |
1,87±0,04 |
0,26±0,01 |
|
АГ+СД2 |
3,74±0,09 |
3,63+0,07 |
2,72±0,06*# |
1,19±0,05* |
|
СД2 |
3,28±0,08 |
3,15±0,07 |
2,31±0,06 |
1,5±0,04* |
* - достоверность по сравнению с контролем, p< 0,05 и ниже
# - достоверность по сравнению с группой
СД2, p< 0,05 и ниже
Из данных таблицы 1
видно, что показатели ОМБ в плазме крови больных обеих групп отличаются от
контрольных показателей. Содержание КДНФГн и АДНФГн в плазме крови больных
группы 1 незначительно повышается, а в плазме крови больных группы 2 также
снижается, однако, эти изменения не носят достоверного характера в обеих
группах. Содержание производных динитрофенилгидразонов основного характера
напротив имеет стойкую тенденцию к повышению относительно контрольных
показателей. При этом в плазме крови больных группы 2 более выражен рост
альдегидпроизводных ДНФГ, а в плазме крови больных группы 1 – КДНФГо.
Известно,
что ОМБ – это процесс, который может привести, как к агрегации, так и к
фрагментации белков. При этом кетонпроизводные рассматриваются как маркеры процессов агрегации, а
альдегидпроизводные – маркеры фрагментации /3/. Таким образом мы можем сделать
вывод о том, что в плазме крови больных с СД2 и сочетанием СД2 и АГ преобладают
процессы фрагментации белков. При этом, процессы агрегации белков плазме крови
больных с сочетанием АГ и СД2 более интенсивны, чем в плазме крови больных с
СД2. Более выраженное изменение содержания
производных динитрофенилгидразонов основного характера возможно
обусловлено неферментативным гликозилированием белков плазмы крови, что в свою
очередь может быть одним из факторов, приводящих к их повышенному разрушению,
т.е. фрагментации.
Таким образом, мы можем сделать вывод о том, что в
крови больных с СД2 и сочетанием СД2 и АГ происходит изменение окислительного
метаболизма, которое выражается в изменении интенсивности процессов ПОЛ и ОМБ.
Рост интенсивности процессов ПОЛ в плазме крови больных с сочетанием СД2 и АГ
более выражен, чем в плазме крови больных с СД2 без АГ. Степень ОМБ в плазме
крови больных обеих групп также сильно отличается от контроля, при этом в обеих
группах отмечается преобладание роста производных ДНФГ основного характера. В
обеих группах отмечается достоверное увеличение содержания маркеров
фрагментации белков, однако, в плазме крови больных с сочетание СД2 и АГ
отмечается также достоверное увеличение содержания маркеров агрегации белков.
Увеличение агрегации белков плазмы крови может приводить к изменению
реологических и динамических свойств крови, что может быть одной из возможных
составляющих патогенеза развития и прогрессирования АГ. В свою очередь, одним
из эффектов АГ может быть тканевая гипоксия, что также может приводить к
увеличению интенсивности ПОЛ и ОМБ. Все эти процессы суммарно будут вносить
свой вклад в «патологический круг АГ» и приводить к дальнейшему
прогрессированию роста артериального давления, поражению магистральных и
периферических сосудов и.т.д.
1.
Кузин А.И., Чередникова М.А., Васильев А.А., Камерер
О.В.. Артериальная гипертензия и сахарный диабет типа 2 у больных
метаболическим синдромом: особенности влияния на липидный спектр.// Артериальная гипертензия. -2003.-N 2.-С.26-30.
2.
Александровский А.Я. Молекулярные
механизмы развития диабетических осложнений //Биохимия – 1998.- Т.63, вып. 11.-
С.1470 –1479.
3.
Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И. Спектрофотометрическое
определения содержания гидроперекисей липидов в плазме крови //Лабораторное
дело – 1983.- № 3.- С.33-36.
4.
Коробейникова Э.Н. Модификация определения продуктов
перекисного окисления липидов в реакции с тиобарбитуровой кислотой //
Лабораторное дело – 1989.- № 7.- С.8-10.
5.
Окислительная модификация белков
сыворотки крови человека, метод ее определения/ Е.Е. Дубинина, С.О. Бурмистров,
Д.А. Ходов и др.// Вопр. мед. химии.–1995.–№1.–с.24-26.
6. Измаханова Д.М. Патогенетические
аспекты артеральной гипертензии при сахарном диабете I типа. Автореферат дис. на соиск. уч.
степ. к.м.н. Алматы. -2002. –С.27.