Барановская И.Б., Лузакова И.А., Проскуряков М.Т., Ригер Н.А.

Кубанский государственный университет (КГУ), Краснодарский консультативно – диагностический центр, г. Краснодар, Российская Федерация

Значение индексов автоматизированного анализа ретикулоцитов в оценке метаболизма железа при железодефицитных анемиях

Одним из направлений в изучении железодефицитных состояний является разработка алгоритмов диагностики, с целью выделения информативных методов, позволяющих верифицировать дефицит железа.

Стандартный набор биохимических тестов, используемых в практической гематологии, в действительности часто недостаточен для объективной оценки степени нарушений обмена железа, причины его развития и решения проблемы адекватной терапии [1].

Уровень ферритина в сыворотке крови - наиболее важный индикатор, позволяющий оценить как степень дефицита, так и избытка железа. Маркером эритропоэтической активности костного мозга является количество и фракционный состав ретикулоцитов. При оценке распределения ретикулоцитов по степени созревания возможны интерпритация результатов и их использование для диагностики и мониторинга различных нарушений костномозгового кроветворения[2].

Цель работы – изучение взаимосвязи между концентрацией ферритина сыворотки крови и показателями гемограммы у пациентов с железодефицитной анемией (ЖДА).

Материалы и методы:

Для исследования показателей автоматизированного анализа ретикулоцитов использовался гематологический анализатор Sysmex XE - 2100 (Sysmex Corpopation).Ретикулоцитарный блок прибора работает на основе принципа проточной цитометрии с применением цитофлюорометрии. Интенсивность флюоресценции, зависящая от содержания остаточной РНК, а, следовательно, от степени зрелости клеток, лежит в основе разделения ретикулоцитов на фракции. Таким образом, кроме стандартных ретикулоцитарных параметров (RET %, -относительное количество ретикулоцитов; RET# , ·10⁶ клеток в 1 мкл - абсолютное количество ретикулоцитов), прибор разделяет популяцию ретикулоцитов на фракции: LFR% - ретикулоциты с низкой флуоресценцией; MFR % -ретикулоциты со средней флуоресценцией; HFR% - ретикулоциты с высокой флуоресценцией; IRF% - фракция незрелых ретикулоцитов- MFR %+ HFR%.

Анализировалась венозная кровь не позднее 10 часов после взятия. Исследовали пробы крови 30 больных (4 мужчины и 26 женщин) в возрасте 40 ± 17,4 года с верифицированным диагнозом железодефицитной анемии до начала лечения и 58 практически здоровых лиц контрольной группы(19 мужчин и 39 женщин в возрасте 41,57 ±14,7 лет с показателями гемоглобина, эритроцитов и гематокрита в пределах существующих норм). Метаболизм железа оценивался с помощью биохимического анализатора фирмы Roche.

Результаты и обсуждение:

Диагноз железодефицитной анемии был подтвержден биохимическими и клиническими лабораторными данными. Для данной группы больных параметры метаболизма железа имели значения: сывороточное железо (СЖ) -3,98 ± 2,16 мкмоль /л; латентная связывающая способность железа (ЛССЖ) - 79,53 ± 9,74 мкмоль /л; ферритин (ФР) - 8,72 ± 3,65 нг /мл. Основные гематологические показатели были следующие:HGB (гемоглобин) – 86,4 ± 17 г/л,RBC (эритроциты) – 4,14 ± 0,52 ·10⁶/л, HCT (гематокрит) – 28,83 ± 3,8 %, MCV(средний объем эритроцита) – 70,0 ± 8,56 фл.

В табл.1 представлены показатели автоматизированного анализа ретикулоцитов для данной группы пациентов в сравнении с контрольной группой. В результате проведенного исследования установлено, что абсолютное количество ретикулоцитов (RET %) и относительное количество ретикулоцитов (RET #) существенно не отличается в норме и при патологии, но наблюдаются качественные различия в содержании ретикулоцитарных фракций.

Таблица 1

Ретикулоцитарные параметры у пациентов с ЖДА

Параметр	ЖДА (n = 30)	Контрольная группа (n=58)
RET, %	0,98 ± 0,4	0,88 ± 0,31
RET #	0,035 ± 0,01	0,045 ± 0,02
IRF,%	14,9 ± 5,11	3,8 ± 2,8
LFR,%	85,1 ± 5,11	96,1 ± 2,8
MFR,%	12,9 ± 5,11	3,5 ± 2,65
HFR,%	2,06 ± 1,23	0,31 ± 0,15

При железодефицитной анемии доля незрелых ретикулоцитов (IRF%), а также соответственно MFR% и HRF % фракций, повышена, что согласуется с данными других авторов[3].Этот факт можно объяснить усилением кроветворения при состояниях связанными с кровопотерями различной этиологии - основными причинами ЖДА. Естественно предположить связь между биохимическими показателями метаболизма железа и ретикулоцитарными индексами, которые являются маркерами кинетики кроветворения.

Сравнительные исследования показали [4], что при дефиците железа, которое не сопровождается другими заболеваниями, концентрация ферритина в сыворотке дает достаточно точное представление о количестве железа в организме. Поэтому в клинической диагностике ферритин используют в первую очередь как параметр, оценивающий депонированное железо. В табл.2 отражена взаимосвязь ретикулоцитарных индексов с основными маркерами метаболизма железа. По нашим данным, содержание сывороточного железа и латентная связывающая способность железа не зависят от ретикулоцитарных индексов.

Таблица 2.

Корреляция (r) параметров автоматизированного анализа ретикулоцитов с показателями обмена железа у пациентов с ЖДА.

Параметр	CЖ	ЛССЖ	ФР
RET, %	0,11	0,13	0,51
RET #,	0,12	0,13	0,5
IRF, %	0,14	0,07	-0,46
LFR, %	- 0,14	- 0,07	0,46
MER, %	0,12	0,11	-0,45
HFR, %	0,15	- 0,03	-0,35

Примечание. Выделенные коэффициенты корреляции статистически достоверны.

Анализируя полученные, значения мы замечаем корреляцию между концентрацией ферритина и ретикулоцитарными индексами: RET % (r = 0,51), RET #( r = 0, 50), IRF(r = - 0,46), LFR (r = 0,46), MFR(r = - 0,45 ) ,HFR( r = - 0,35).

Таким образом, увеличение относительного и абсолютного количества ретикулоцитов, а также фракции ретикулоцитов с низкой флуоресценцией (зрелых) соотносится с увеличением сывороточного ферритина у больных с ЖДА. А увеличение фракций незрелых ретикулоцитов коррелирует с уменьшением в сыворотке запасов железа у пациентов этой группы.

Выводы:

1.У больных с железодефицитной анемией, при абсолютном и относительном количестве ретикулоцитов в пределах нормы, наблюдается “левый сдвиг” в сторону увеличения доли незрелых эритроцитов (IRF), с соответствующим увеличением процентного содержания фракций MFR и HFR.

2.Выявлена взаимосвязь между концентрацией ферритина и основными ретикулоцитарными индексами, что позволяет делать выводы об адекватном поступлении железа в клетки эритропоэза у пациентов с ЖДА.

Мы полагаем, что ретикулоцитарные параметры, полученные при автоматизированном анализе на анализаторе Sysmex XE-2100 могут быть информативны в качестве дополнительного критерия диагностики и мониторинга различных нарушений эритропоэза.

Литература:

1.Левина А.А., Цветаева Н.В., Колошейнова Т.И. Клинические, биохимические и социальные аспекты железодефицитной анемии // Гематология и трансфузиология.-2001.-т.46.-№ 3.- с. 51-55.

2.Коленкин С.М. Референтные величины параметров автоматизированного анализа ретикулоцитов //Клиническая лабораторная диагностика .-2003.-№ 1.-с. 40 – 42.

3.Watanabe K, Kawai Y,Takeuchi K, Shimizi N, Iri H, Ikeda Y, Houwen B. Reticulocyte maturity as an indicator for estimating qualitative abnormality of erythropoiesis // Journal of Clinical Parhtology.-1994.-Vol.47.- P.736 – 739.

4.Долгов В.В., Луговская С.А. ,Почтарь М.Е.Лабораторная диагностика нарушений обмена железа.-2002.-“Витал Диагностикс СПб “.-52 с