Изучение влияния состава питательной среды на продукцию фосфолипазы D клетками Streptomyces netropsis

Authors

  • ЛЛ Биричевская Республика Беларусь
  • АИ Зинченко Республика Беларусь
  • МА Винтер Республика Беларусь
  • СД Бруякин Республика Беларусь

Abstract

Фосфолипаза D (ФЛД; КФ 3.1.4.4) – фермент, который катализирует гидролиз фосфодиэфирной связи фосфолипидов, образуя фосфатидную кислоту и спиртовой остаток. В дополнение к гидролитической активности, ФЛД также может катализировать замещение полярных групп фосфолипидов по процессу, называемому трансфосфатидилирование [1]. Благодаря доступности ФЛД из растений и микроорганизмов и достаточно высокой эффективности процесса трансфосфатидилирования, этот подход применяется для получения в аналитическом и препаративном количествах разнообразных фосфолипидов [2]. Как известно, уровень биосинтеза ферментов микроорганизмами зависит не только от генетических особенностей штаммов-продуцентов, но и от состава питательной среды и условий их культивирования. В этой связи, целью настоящего исследования было изучить влияние культуральной среды на образование ФЛД клетками актиномицета Streptomyces netropsis, селектированного ранее в лаборатории молекулярной биотехнологии Института микробиологии НАН Беларуси и депонированного в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов Института микробиологии НАН Беларуси под номером БИМ В-428Д [3]. Ранее нами был подобран состав культуральной среды для максимальной продукции ФЛД штаммом S. netropsis БИМ В-235 (исходный штамм при селекции штамма S. netropsis БИМ В-428Д) и выявлено, что накопление фермента в культуральной жидкости (КЖ) происходит только при выращивании бактерий на натуральных средах, богатых органическим азотом. На начальном этапе настоящего исследования мы изучили влияние двух питательных сред (ІІ и ІІІ), рекомендованных Международным проектом по стрептомицетам (ISP) для культивирования микроорганизмов рода Streptomyces, на активность ФЛД в КЖ S. netropsis БИМ В-428Д, по сравнению с оптимизированной питательной средой, подобранной нами ранее [4] (І). Среды для культивирования микроорганизмов:

References

1. Yang, S. Transphosphatidylation by phospholipase D / S. Yang, S. Freer, A. Benson // J. Biol. Chem. – 1967. – Vol. 242. – P. 477–484.

2. Industrial uses of phospholipases: current state and future applications / S. Cerminati [et al.] // Appl. Microbiol. Biotechnol. – 2019. – Vol. 103, № 6. – P. 2571–2582.

3. Штамм бактерий Streptomyces netropsis, продуцирующий фосфолипазу D: пат. 11915 Респ. Беларусь / Л.Л. Биричевская, Л.А. Ерошевская, А.И. Зинченко; заявл. 15.08.2007; опубл. 30.06.2009.

4. Биричевская, Л.Л. Биосинтез, свойства и применение фосфолипазы D Streptomyces netropsis БИМ В-235: дис. канд. биол. наук: 03.00.07 / Л.Л. Биричевская; Минск, 2009. – 148 с.

5. A comparison of enzymatic phosphorylation and phosphatidylation of β-L-and β-D-nucleosides / L.L. Birichevskaya [et al.] // Biotechnol. Lett. – 2007. – Vol. 29, № 4. – P. 585–591.

6. Bradford, M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / M. Bradford // Anal. Biochem. – 1976. – Vol. 72. – P. 248–254.

Published

2020-02-02

How to Cite

Биричевская, Л., Зинченко, А., Винтер, М., & Бруякин, С. (2020). Изучение влияния состава питательной среды на продукцию фосфолипазы D клетками Streptomyces netropsis. Pridneprovskiy Scientific Bulletin, 6(662). Retrieved from http://www.rusnauka.com/index.php/rusnauka/article/view/1848